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51．(14分)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能

主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜

帶O₂或CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎

動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

　 (1)血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品的處理、粗提取、純化、鑒定四步。　　 實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入抗凝劑，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。樣品的處理，它包括　　　　　　 、　　　　　　 、分離血紅蛋白溶液、透析。　　

　 (2)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過(guò)透析，這就是樣品的粗分離。

①透析的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②透析的原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

　 (3)本試驗(yàn)通過(guò)　　　　 　　法將樣品進(jìn)一步純化。

　 (4)對(duì)最終獲得的蛋白質(zhì)進(jìn)行純度鑒定采用的方法是　　　　　　 電泳。

　 (5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白，這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受　 到研究者重視。

①分離該抗菌蛋白也可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的　　　　　　 、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的　　　　　　 不同而實(shí)現(xiàn)分離。

②可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉　 膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供　　　　　　 和　　　　 　　。

③分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的　　　　　　 ，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

④細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有　　　　　　 和　　　　　　 。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行　　　　　　 處理。

48．(8分)酶是生物合成的催化劑，隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，酶已經(jīng)走出實(shí)驗(yàn)室，走進(jìn)人們的生活。酶的廣泛應(yīng)用離不開(kāi)人們對(duì)酶的作用機(jī)理的準(zhǔn)確認(rèn)識(shí)。

　 　 (1)下圖所示為人胰蛋白酶作用于一定量的某種物質(zhì)(底物)，溫度和pH保持在最適值，生成物量與反應(yīng)時(shí)間關(guān)系，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

①該酶作用的底物是　　　　　　 。

②在140分鐘后，曲線變成水平，這是因?yàn)?u>　　　　 。

③若增加胰蛋白酶濃度，其他條件不變，請(qǐng)?jiān)谠瓐D上畫(huà)

出生成物量變化的示意曲線。

④若胰蛋白酶濃度和其他條件不變，反應(yīng)液pH由2逐漸升高到l0，則酶催化反應(yīng)的速度將　　　　　　 ，原因是　　　　　　 。

　 (2)加酶洗衣粉可以消除衣物上不易清除的蛋漬和奶漬。一般加酶洗衣粉的袋子上印有　 如下說(shuō)明：洗滌前請(qǐng)將衣物浸于加有適量冼衣粉的的溫水內(nèi)數(shù)小時(shí)，切勿用60度以上的水；切勿用于絲質(zhì)或羊毛衣料：用后須用清水洗手。依據(jù)以上材料，回答有關(guān)問(wèn)題。衣物上的蛋漬和奶漬主要成分為　　　　　　 ，洗衣粉中相關(guān)作用物質(zhì)的成分主要為　　　　　　 。此類(lèi)洗衣粉不能用于絲質(zhì)或羊毛衣料的洗滌，原因是　　　　　　　　　　　　 。

　 49．(8分)DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)

　 (1)本實(shí)驗(yàn)材料選用雞血，在取材時(shí)每100毫升血液中要加入3克　　　　　　 ，作用是　　　　　　 。在提取DNA過(guò)程中并不采用雞的全血，主要原因是　　　　　　 。

　 (2)圖A中加入蒸餾水的目的是　　　　 　　。

　 (3)通過(guò)圖B所示步驟取得濾液后，再向?yàn)V液中加入2mol·L^-1的NaCl溶液的目的是　　　　　　　　　　　　 。

　 (4)圖C所示加入蒸餾水的目的是　　　　　　　　　　　　 。

　 (5)為鑒定實(shí)驗(yàn)所得絲狀物的主要成分是DNA，可用　　　　　　 試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，顏色反應(yīng)為　　　　　　　　　　　　 色。

　 50．(8分)資料顯示，近十年來(lái)，PCR技術(shù)(DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù))成為分子生物實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制的特性，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖)，在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。請(qǐng)據(jù)圖回答：

　 (1)PCR一般要經(jīng)過(guò)30多次循壞，每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性、延伸三步。其中熱至94℃的目的是使DNA樣品的　　　　　　 鍵斷裂，這一過(guò)程在生物體細(xì)胞內(nèi)是　　 通過(guò)　　　　　　 酶的作用來(lái)完成的。

　 (2)通過(guò)PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制時(shí)，若將一個(gè)用¹⁵N標(biāo)記的模板DNA分子(第　 一代)放入試管中，以¹⁴N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制到第五代時(shí)，含¹⁵N標(biāo)記的DNA分子單鏈數(shù)占全部DNA總單鏈數(shù)的比例為　　　　　　 。該樣品DNA中共含有3000個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：(A+T)：(G+C)=1／2，現(xiàn)在要得到1000個(gè)拷貝(即與樣本相同的DNA)，至少要向試管中加入　　　　　　 個(gè)腺嘌呤脫　　 氧核苷酸。

　 (3)由于真核生物中染色體上“遺傳因子”基本都是符合孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律的，因此人　　 類(lèi)可以利用PCR技術(shù)合成的DNA進(jìn)行親子鑒定，其原理是：首先獲取被測(cè)試者的DNA，并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，取其中一樣本DNA用限制性內(nèi)切酶切成特定的小片段，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動(dòng)DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因。相同的基因會(huì)凝聚在一起，然后利用特別的染料在X光下，便會(huì)顯示由DNA探針凝聚于一起的黑色條碼。每個(gè)人的條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合。

①限制性內(nèi)切酶能將DNA樣品切成特定的小片段，這主要體現(xiàn)了酶的　　　　　 。

A．專(zhuān)一性　　 B．高效性　　 C．多樣性D．作用條件溫和

　 ②雙胞胎或多胞胎的“基因身份證明”是否一定完全相同?　　　　　　 ，原因是　　　　　　 。

③右圖為某小孩和其母親以及待測(cè)定的四位

男性的DNA指紋圖譜示意圖，請(qǐng)推測(cè)該小孩

真正生物學(xué)上的父親是　　　　　　 。

46．(5分)某一實(shí)驗(yàn)小組的同學(xué)用酵母菌在含有葡萄糖的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)的吸氧量(氣體體積)和二氧化碳的發(fā)生量(氣體體積)。請(qǐng)同答下列有關(guān)問(wèn)題：

　 (1)在酵母菌只進(jìn)行有氧呼吸時(shí)，其吸氧量和二氧化碳的產(chǎn)生量之比是　　　　 。

　 (2)用酵母菌釀酒的開(kāi)始階段即充分供氧的情況下，酵母菌大量繁殖的方式是　　 。

　 (3)此時(shí)酵母菌若分解360克葡萄糖，則可生成　　　　　　 摩爾的乙醇，寫(xiě)出相關(guān)的化學(xué)反應(yīng)式　　　　　　 　　　　　　　　　　　　

　 (4)當(dāng)這一密閉的培養(yǎng)液中的乙醇達(dá)到一定量后，CO₂不再增加的原因可能是　　　　　　　　　　　　 。

　 47．(7分)某實(shí)驗(yàn)小組的同學(xué)，欲通過(guò)制備固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行葡萄糖溶液發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料及用具齊全。

　 (1)制備固定化酵母細(xì)胞常用　　　　　　 法。

　 (2)制備固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程為：

*使干酵母與　　　　　　 混合并攪拌，使酵母菌活化；

*將無(wú)水CaCl₂溶解在蒸餾水中，配成CaCl₂溶液；

*用酒精燈加熱配制合適濃度的海藻酸鈉溶液；

*海藻酸鈉溶液冷卻至常溫再加入已活化的酵母細(xì)胞，

充分?jǐn)嚢璨⒒旌暇鶆颍?/p>

*用注射器將A的混合物緩慢滴入氯化鈣溶液中。

分析；影響實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟是　　　　　　　　　　　　 ；

　 (3)該實(shí)驗(yàn)小組用如幽所示的裝置來(lái)進(jìn)行葡萄糖發(fā)酵。(a是固定化酵母，b是反應(yīng)柱。)

①?gòu)纳隙寺┒分屑尤敕磻?yīng)液的濃度不能過(guò)高的原因是：　　　　　　 。

②要想得到較多的酒精，加入反應(yīng)液后的操作是關(guān)閉活塞1和　　　　　　 活塞2。

③為使該實(shí)驗(yàn)中所用到的固定化酵母細(xì)胞可以反復(fù)利用，實(shí)驗(yàn)過(guò)程一定要在　　　　　　

條件下進(jìn)行。

④裝置中的曲頸長(zhǎng)導(dǎo)管起的作用是　　　　　　　　　　　　 。

45．以下對(duì)DNA和血紅蛋白的提取與分離(鑒定)實(shí)驗(yàn)的分析不正確的是　　　　　 (　　 )

　 　　 A．都要用豬血細(xì)胞來(lái)做實(shí)驗(yàn)

　 　　 B．在DNA的粗提取與鑒定試驗(yàn)中，有兩次DNA析出，所用的方法相同

　 　　 C．在實(shí)驗(yàn)中都要進(jìn)行除雜處理以便得到較純凈的DNA或血紅蛋白

　 　　 D．將析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后呈現(xiàn)藍(lán)色

第Ⅱ卷(共50分)

44．下列實(shí)驗(yàn)中，需對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行研磨以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡挠小　　　　　　　　　　　　　　?(　　 )

　　 A．提取洋蔥的DNA　　 　　　　　　　　　　　　 B．提取菠菜綠葉中的色素

　　 C．提取牛的血紅蛋白　　 　　　　　　　　　　　 D．提取豬肝細(xì)胞中的過(guò)氧化氫酶

43．在“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2mL　　 的四種溶液中，經(jīng)攪拌后過(guò)濾，獲得4種濾液，含DNA較少的是 (　　 )

　　　 A．濾液E　　 　　　　 B．濾液F　　 　　　　　 C．濾液G　　 　　　　 D．濾液H