限制酶 | MspⅠ | BamHⅠ | MboⅠ | SmaⅠ |
識別序列及切割位點 | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() |
分析 據圖分析,細胞A表示效應B細胞,細胞Y表示雜交瘤細胞,①過程表示動物細胞融合,②過程動物細胞培養,③過程提取信使RNA,④過程表示逆轉錄,⑤表示基因表達載體的構建,⑥表示導入受體細胞.
根據圖1分析,DNA片段含有兩個SmaⅠ識別位點,第一個識別位點在左端534bp序列向右三個堿基對的位置;第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基的位置.
根據圖2分析,若使用MboI會同時破壞質粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamHI來切割目的基因和質粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于篩選出含有重組質粒的受體細胞.
解答 解:(1)向健康人體注射特定抗原,提取出A漿細胞(效應B淋巴細胞),在人體參與體液免疫.
(2)過程①至②抗體的獲取稱為單克隆抗體,其中①是細胞融合過程,Y細胞稱為雜交瘤細胞.
(3)SmaⅠ識別的序列為GGGCCC,切割會產生平末端;圖1中DNA片段含有兩個SmaⅠ識別位點,第一個識別位點在左端534 bp序列向右三個堿基對的位置;第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基的位置,從而兩個位點切割后產生的DNA片段的長度分布為534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段長度為537、790、661.
(4)在雜合子體內含有基因D和基因d,基因D的序列中含有兩個識別位點,經過SmaI完全切割會產生537bp、790bp和661bp三種不同長度的片段,基因d的序列中含有一個識別位點,經過切割后會產生1327bp和661bp兩種長度的片段,綜上,雜合子中分離到該基因的DNA片段經過切割后會產生4種不同長度的片段.
(5)固定化酶的優點:①既能與反應物接觸,又能與產物分離;②可以反復利用.
(6)能夠獲取目的基因并切開質粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序列為GATC的MboI,若使用Mbo I會同時破壞質粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I來切割目的基因和質粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于篩選出含有重組質粒的大腸桿菌.因為目的基因和運載體是用同種限制酶切割的,目的基因兩端的末端和質粒切割后的兩個末端都能進行互補,可能出現目的基因反向連接在運載體上的情況,導致基因D不能正確表達.在培養前,培養基常用高壓滅菌滅菌;采用劃線(或涂布)的方法接種以獲得單菌落后繼續篩選.
故答案為:
(1)漿細胞(效應B淋巴細胞) 體液
(2)單克隆抗體 細胞融合 雜交瘤細胞
(3)537、790、661(寫全給分)
(4)4
(5)酶的固定化
(6)BamHⅠ抗生素B 固體 高壓蒸汽滅菌 平板劃線法(或稀釋涂布平板法)
點評 本題考查單克隆抗體的制備、基因工程、固定化酶、微生物的培養等相關知識,要求考生能夠識記體液免疫的過程,掌握單克隆抗體制備的過程,掌握微生物分離與培養的有關知識.
科目:高中生物 來源: 題型:解答題
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 過程①伴隨有ATP的產生 | |
B. | 過程②發生時的產物還有五碳化合物 | |
C. | 過程③需要消耗水 | |
D. | 過程④發生在線粒體的基質中 |
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 葉綠體色素濾液細線浸入層析液,可導致濾紙條上色素帶重疊 | |
B. | 低溫誘導大蒜根尖時間過短,可能導致難以觀察到染色體加倍的細胞 | |
C. | 鑒定待測樣液中的蛋白質時,先加CuS04溶液,振蕩后再加NaOH溶液 | |
D. | 將洋蔥表皮放入0.3g/ml蔗糖溶液中,水分交換平衡后制成裝片觀察質壁分離過程 |
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 11 | B. | 12 | C. | 13 | D. | 14 |
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌入侵 | |
B. | 劃線分離可在培養基上獲得均勻分布的單菌落 | |
C. | 高溫滅菌目的是殺死微生物的細胞、孢子、芽孢 | |
D. | 稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計數活菌數目 |
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 含有5種含氮的堿基 | |
B. | 不能用培養細菌的培養基進行培養 | |
C. | 唯一的細胞器是核糖體 | |
D. | 進入人體后能夠在組織液中長期生存 |
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 起始密碼子是轉錄的起始位點 | |
B. | 在DNA復制過程中要遵循堿基互補配對原則,而翻譯則不遵循 | |
C. | 基因可以通過控制蛋白質的結構直接控制生物的性狀 | |
D. | 通常一個mRNA上只能連接一個核糖體,進行一條肽鏈的合成 |
查看答案和解析>>
湖北省互聯網違法和不良信息舉報平臺 | 網上有害信息舉報專區 | 電信詐騙舉報專區 | 涉歷史虛無主義有害信息舉報專區 | 涉企侵權舉報專區
違法和不良信息舉報電話:027-86699610 舉報郵箱:58377363@163.com