Question

11．磷是植物生長的重要營養(yǎng)元素之一，我國74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤的磷肥只有5%-25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的難溶性磷酸鹽．為了從土壤中篩選出能夠?qū)㈦y溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株，以便將其添加到有機(jī)肥中，改善植物磷元素供應(yīng)．科研人員進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：
實(shí)驗(yàn)原理：固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會(huì)在菌落周圍形成透明圈（如圖），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（$\frac{D}p9vv5xb5$）代表微生物溶解磷的能力大小．
實(shí)驗(yàn)步驟：
步驟1取某地區(qū)土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基A上，在適宜溫度下培養(yǎng)72h．
步驟2 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基A上用接種環(huán)挑取代表性菌落再次接種，培養(yǎng)3〜4d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優(yōu)良解磷菌株（如表）．

菌株	透明圈直徑 （D）單位：mm	菌落直徑 （d）單位：mm	$\frac{D}p9vv5xb5$
甲	22.8	15.3	1.5
乙	20.7	7.7	2.7
丙	8.2	7.5	1.1

請(qǐng)分析回答下列問題：
（1）土壤中的磷以PO₄^3-（HPO₄^2-或H₂PO^4-）形式被植物細(xì)胞吸收，吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等（填出3種含磷的有機(jī)物）．
（2）實(shí)驗(yàn)中所用的固體培養(yǎng)基往往是在液體培養(yǎng)基中加人凝固劑瓊脂制備的，培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個(gè)種群（填“種群”、“群落”、“生態(tài)系統(tǒng)”）．
（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應(yīng)該是難溶性磷酸鹽，步驟1中接種方法是稀釋涂布平板法，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是灼燒滅菌．
（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以確定溶解磷能力最強(qiáng)的菌株是乙．為了保持所得菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏．臨時(shí)保藏時(shí)，要將菌種接種到試管的固體斜面格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時(shí)可以采用甘油管藏的方法．

Answer 1

分析 分析題意可知，“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（$\frac{D}p9vv5xb5$）代表微生物溶解磷的能力大小”，結(jié)合表格可知，菌株乙的比值（$\frac{D}p9vv5xb5$）最大，說明菌株乙的溶解磷的能力最大．

解答 解：（1）土壤中的磷以離子形式被植物細(xì)胞吸收，磷離子的存在形式有PO₄^3-（HPO₄^2-或H₂PO^4-），吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等含磷的有機(jī)物．
（2）固體培養(yǎng)基往往加人瓊脂作為凝固劑．培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個(gè)種群．
（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應(yīng)該是難溶性磷酸鹽，步驟1中“制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基A上”，由此可見接種方法是稀釋涂布平板法，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是灼燒滅菌．
（4）“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（$\frac{D}p9vv5xb5$）代表微生物溶解磷的能力大小”，結(jié)合表格可知，菌株乙的比值（$\frac{D}p9vv5xb5$）最大，說明菌株乙的溶解磷的能力最大．為了保持所得菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏．臨時(shí)保藏時(shí)，要將菌種接種到試管的固體斜面格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時(shí)可以采用甘油管藏的方法．
故答案為：
（1）PO₄^3-（HPO₄^2-或H₂PO^4-）     核酸、磷脂、ATP、NADPH等
（2）瓊脂  種群
（3）難溶性磷酸鹽     稀釋涂布平板法     灼燒滅菌
（4）乙  固體斜面  甘油管藏

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合實(shí)驗(yàn)表格結(jié)果考查了微生物培養(yǎng)和分離的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記磷元素在土壤中的存在形式以及含磷的有機(jī)物，掌握微生物分離與純化的方法，識(shí)記菌種的保藏的方法．