Question

2．某高校研發的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預防效果，其有效成分是一種該菌表面抗原蛋白質，請回答下列問題．
（1）根據表面抗原蛋白質的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進行人工合成，然后通過PCR技術大量擴增．
（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達的載體．其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（3）目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為轉化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識和結合，從而驅動轉錄過程．最終翻譯是否成功，常用的檢測方法是抗原-抗體雜交．
（4）實驗證明，一定時間內間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內產生的記憶細胞數量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續時間更久．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）采用人工合成法獲得目的基因時，可根據表面抗原蛋白質的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進行人工合成，然后通過PCR技術大量擴增．
（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達的載體．其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（3）目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為轉化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識和結合，從而驅動轉錄過程．翻譯的產物是蛋白質，因此檢測翻譯是否成功，常用抗原-抗體雜交法．
（4）實驗證明，一定時間內間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內產生的記憶細胞數量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續時間更久．
故答案為：
（1）脫氧核苷酸序列      PCR
（2）構建基因表達的載體      鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來　
（3）轉化      RNA 聚合酶         抗原-抗體雜交
（4）記憶

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關細節，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．