Question

12．回答下列有關微生物的問題：
臨床使用抗生素前，有時需要進行細菌的耐藥性實驗．試驗時，首先從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟進行操作，以確定從病人身上獲得的致病菌對不同抗生素的敏感性．
（1）取該致病菌單菌落適當稀釋，用涂布法接種于固體培養基表面，在37℃培養箱中培養24h，使其均勻生長，布滿平板．
（2）為了檢測獲得的致病菌對于抗生素的敏感性，將含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片分別均勻地放置在四塊平板上，培養一段時間后，得到的結果為：含A抗生素的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對A抗生素敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A弱；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現了一個小菌落，在排除雜菌污染的情況下，很可能此菌對D抗生素產生了耐藥性．
（3）根據上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素A．
（4）下面的甲圖表示酵母菌、硝化細菌和乳酸菌在半固體培養基中的生長情況，乙圖表示這三種菌的增殖速度與氧濃度之間的關系，請據圖作答：

①乙中a、b、c三條曲線分別表示甲中3號試管、2試管和1試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度．
②研究發現，青霉素能破壞細菌的細胞壁并在細菌細胞的繁殖期起殺菌作用．如果培養基中混雜了這三類微生物；設計實驗，利用改變培養基成分等條件，將酵母菌和硝化細菌分離出來．要分離出酵母菌的方法是培養基成分加抗生素；要分離出硝化細菌的方法是培養基成分不加有機碳源．

Answer 1

分析 （1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（2）分析甲圖：1號試管中的菌體集中在培養液的表層，說明是好氧性硝化細菌；2號試管的菌體在培養液的均勻分布，說明是兼性厭氧性的酵母菌；3號試管的菌體集中在培養液的底層，說明是厭氧性的乳酸菌．
（3）分析乙圖：a曲線，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度減慢，說明是乳酸菌；b無氧時繁殖速度較慢，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度增加，說明是酵母菌；c氧氣濃度到一定程度，才能繁殖，說明是硝化細菌．

解答 解：（1）分離菌落常用稀釋涂布平板法或劃線涂布法．取該單菌落適當稀釋，使其“均勻生長”的方法是用涂布法接種于固體培養基表面，適宜溫度培養．
（2）在抗藥性檢驗過程中，如果在菌落周圍出現透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強弱．將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙均勻置于該平板上的不同位置，培養一段時間后，含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，說明該病菌對抗生素B不敏感；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該病菌對C的敏感性比對A的弱．含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的耐藥菌．
（3）根據（2）的分析，實驗結果抗生素A對該致病菌的作用最好．
（4）①乙圖中a曲線，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度減慢，說明是乳酸菌，對應于3號試管；b無氧時繁殖速度較慢，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度增加，說明是酵母菌，對應于2號試管；c氧氣濃度到一定程度，才能繁殖，說明是硝化細菌，對應于1號試管．
②在培養基中加入抗生素，只有酵母菌能生長；硝化細菌為化能自養型的生物，可以合成有機物供自身利用，接種到不含有機碳源的培養基中，可分離出硝化細菌．
故答案為：
（1）涂布   
（2）敏感    該致病菌對C的敏感性比對A弱   耐藥性   
（3）A
（4）①3   2   1   ②加抗生素    不加有機碳源

點評 本題的知識點是微生物培養過程中的接種方法，以及分析實驗結果獲取結論的能力和，利用所學的微生物知識解決生活問題的能力，解決問題的關鍵是運用所學過的知識點“透明圈”，進行知識點的遷移、類比，然后解決問題．