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5．如圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖回答：

（1）能否利用人的皮膚細胞來完成①過程？不能．為什么？皮膚細胞中的胰島素基因未表達（或未轉錄），不能形成胰島素mRNA．
（2）過程②必需的酶是反轉錄酶，合成A的原料是四種脫氧核苷酸．
（3）在利用A、B獲得C的過程中，必須用同一種限制酶切割A和B，使它們產生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶，才可形成C．

4．基因工程中因受體細胞不同，目的基因導入的方法也不同，下列敘述不正確的是（　�。�

	A．	將目的基因導入棉花細胞內常用花粉管通道法
	B．	將目的基因導入小麥細胞內常用農桿菌轉化法
	C．	將目的基因導入大腸桿菌內常用感受態細胞轉化法
	D．	將目的基因導入老鼠細胞內常用顯微注射法

3．如圖為純種荷斯坦小奶牛的繁殖過程，請據圖回答下列問題．
（1）克隆動物培育過程與圖示繁殖過程相比，特有的技術手段是核移植技術．
（2）受精卵體外培養所需的培養液成分一般比較復雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等物質．
（3）如果培育轉基因荷斯坦奶牛，可采用顯微注射技術將藥用蛋白基因導入受精卵中，在檢測受體細胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因時，常采用的方法是DNA分子雜交技術，根據是否顯示出雜交帶進行鑒定．
（4）純種荷斯坦奶牛的胚胎能在受體黃牛的子宮內存活并正常發育的生理原因是受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系．

2．供體器官的短缺和排斥反應是制約器官移植的兩個重要問題．而治療性克隆能最終解決這些問題．如圖是治療性克隆的過程圖解．

（1）正常情況下，去核的卵母細胞取自女性卵巢排卵后在輸卵管中減數第二次分裂中期的卵母細胞．
（2）重組細胞發育的過程中，細胞開始分化發生在囊胚期．
（3）治療性克隆所用到的技術名稱是核移植，要想獲得基因型完全相同的兩個胚胎，可采用胚胎分割技術．
（4）已知病人是紅綠色盲的女性，圖中提供卵母細胞的為完全正常的年輕女性．移植器官后，該病人所生育子代紅綠色盲的情況是男孩紅綠色盲，女孩不一定．
（5）我國禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆的研究，請你談談為什么要反對克隆人．（至少寫出兩條理由）①嚴重違反了人類倫理道德；②沖擊了現有的婚姻、家庭和兩性關系等傳統的倫理道德觀念；③是在人為地制造心理上和社會地位上都不健全的人；④克隆技術尚不成熟，可能克隆出有嚴重生理缺陷的孩子．

1．現代生物技術制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請回答問題．

（1）①過程表示逆轉錄，②過程用到的工具酶是限制性核酸內切酶（限制酶）．
（2）構建基因表達載體時，目的基因的首端必須含有啟動子，它的作用是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質，尾端必須有終止子，標記基因的作用為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來，③過程常用的方法是顯微注射法，目的基因能否在受體細胞中穩定遺傳的關鍵是轉基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因．
（3）從分子水平上鑒定目的基因是否轉錄可采用分子雜交技術，檢測目的基因是否翻譯成蛋白質采用的方法抗原-抗體雜交
（4）若要預防H7N9禽流感，可用圖中的抗原蛋白作為疫苗．

20．如圖為吉林大學農學部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉人賴氨酸基因的克隆�！翱椗�”的大致過程，請據圖回答問題．

（1）克隆�！翱椗�”的誕生過程中涉及到的細胞水平的現代生物技術主要有：核移植技術、動物細胞培養、胚胎移植 （至少答出兩項）
（2）實施基因工程包括四個基本操作步驟，其核心步驟是基因表達載體的構建，實現②過程的常用方法是顯微注射法
（3）現有-長度為1000堿基對（by）的DNA分子，用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，說明此DNA分子為環狀 （填“線性”或“環狀”），用Kpn I單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200by和600by兩種長度的DNA分子．請繪出該DNA分子的酶切圖譜的示意圖： （請在圖中標明限制酶的類型、酶切位點和堿基長度）．

19．限制性內切酶能識別特定的DNA序列并進行剪切，不同的限制性內切酶可以對不同的核酸序列進行剪切．現以3種不同的限制性內切酶對6.2kb大小的線狀DNA進行剪切后．用凝膠電泳分離各核酸片段，實驗結果如圖所示：

請問：3種不同的限制性內切酶在此DNA片段上相應切點的位置是（　�。�

	A．
	B．
	C．
	D．

18．某線性DNA分子含有3 000個堿基對（bp），先用限制酶a切割，再把得到的產物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表．限制酶a和b的識別序列和切割位點如圖所示．下列有關說法正確的是（　�。�

a酶切割產物（bp）	b酶再次切割產物（bp）
1600；1100；300	800；300

	A．	在該DNA分子中，a酶與b酶的識別序列分別有3個和2個
	B．	a酶與b酶切出的黏性末端不能相互連接
	C．	a酶與b酶切斷的化學鍵不同
	D．	用這兩種酶和DNA連接酶對該DNA分子進行反復切割、連接操作，若干循環后，$\left.\begin{array}{l}{-AGATCC-}\\{-TCTAGG-}\end{array}\right.$序列會明顯增多

17．近些年來，棉鈴蟲在我國大面積爆發成災，造成巨大的經濟損失；隨之而來，化學農藥的產量和種類也在逐年增加，但害蟲的抗藥性也在不斷增強．針對這種情況，我國科學家采用基因工程技術，開展了“轉基因抗蟲棉”的研究，成功地將細菌的毒蛋白基因導入到棉花細胞中，從而使棉花植株的細胞內能合成這種毒蛋白．以后棉鈴蟲再啃食這種棉花時，就會攝入毒蛋白，雖吃得很飽，但不能消化，最后只能慢慢餓死．這就是轉基因抗蟲棉不易受到害蟲侵害的原因．據以上材料，分析回答下列問題：
（1）細菌的基因之所以能嫁接到棉花體內，原因是①組成細菌和植物的DNA分子的空間結構和化學組成相同 ②有互補的堿基序列．
（2）科學家預言，此種“轉基因抗蟲棉”獨立種植若干代以后，將出現不抗蟲的植株，此現象來源于基因突變
（3）在此過程中所用的質粒載體通常來自于下列哪種微生物A
A．土壤農桿菌    B．大腸桿菌    C．枯草桿菌     D．放線菌
（4）某棉農在食用該抗蟲棉種子壓榨的棉籽油炒的芹菜后，出現鼻塞流涕，皮膚騷癢難忍癥狀，一段時間后這些癥狀又自然消失，該現象可能是過敏反應
（5）利用基因工程技術培育抗蟲棉，相比傳統的雜交育種方法，其優點主要表現為能根據人類的需要，定向改造遺傳物質，獲得優良遺傳性狀．

16．在胰島素的基因與質粒形成重組DNA分子的過程中，下列哪組時所需要的（　�。�

	A．	用同一種限制酶切割兩者		B．	不需用同一種限制酶切割兩者
	C．	加入適量的DAN連接酶		D．	不需加DNA連接酶