Question

20．如圖為吉林大學農學部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉人賴氨酸基因的克隆牛“織女”的大致過程，請據圖回答問題．

（1）克隆牛“織女”的誕生過程中涉及到的細胞水平的現代生物技術主要有：核移植技術、動物細胞培養、胚胎移植 （至少答出兩項）
（2）實施基因工程包括四個基本操作步驟，其核心步驟是基因表達載體的構建，實現②過程的常用方法是顯微注射法
（3）現有-長度為1000堿基對（by）的DNA分子，用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，說明此DNA分子為環狀 （填“線性”或“環狀”），用Kpn I單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200by和600by兩種長度的DNA分子．請繪出該DNA分子的酶切圖譜的示意圖： （請在圖中標明限制酶的類型、酶切位點和堿基長度）．

Answer 1

分析 分析題圖：①是取自黑白奶牛的成纖維細胞；②表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞；③是采用胰蛋白酶處理后得到的單個細胞；④表示囊胚；⑤表示胚胎分割技術；⑥表示胚胎移植過程；⑦表示妊娠產生轉人賴氨酸基因的克隆牛“織女”．

解答 解：（1）從圖示可看出該流程涉及的生物技術有：核移植技術、動物細胞培養，早期胚胎培養、胚胎移植．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建，②表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞．
（3）用限制性核酸內切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，由此可推知該DNA分子為環狀DNA；用Kpnl單獨酶切會得到600by和400by兩種長度的DNA分子和用EcoRI，Kpnl同時酶切后得到200by和600by兩種長度的DNA分子，如圖：

故答案為：
（1）核移植技術、動物細胞培養、胚胎移植    
（2）基因表達載體的構建顯微注射法
（3）環狀  

點評 本題考查胚胎工程相關知識，意在考查學生是否理解實驗方法和操作步驟，能否把所學知識的要點，知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構；關注科學、技術在社會發展中的作用．