Question

14．在農業生產中發現一種廣泛使用的除草劑（含氮豐富的有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋（梯度稀釋）處理．
（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養基的成分應注意以該除草劑為唯一氮源．從物理性質上看，該培養基為固體培養基．制備該培養基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
（3）在第2次及其后劃線總從上次劃線末端開始的原因是劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少．
（4）培養后發現，只有很少菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長的主要原因是培養基中缺少這些細菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細菌的生長．其中無透明帶菌落的出現說明該培養基中還出現了能利用氮氣的微生物．

Answer 1

分析 據圖分析：該實驗是從土壤中篩選分離能降解除草劑的微生物的過程．這樣的實驗要將土壤稀釋處理，以除草劑為唯一的氮源進行處理篩選土壤微生物，以菌落計數法進行統計計數．

解答 解：（1）1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養基的成分應注意以該除草劑為唯一氮源．從物理性質上看，該培養基為 固 體培養基．制備該培養基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
（3）在作第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是（劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少），每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落．
（4）在以該除草劑為唯一氮源的培養基上，不能降解該除草劑的細菌（除具有固氮能力的細菌外）是不能生長的．
（5）無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，含一定量該除草劑的培養基不透明，形成透明圈是由于該除草劑被某些細菌降解．
故答案為：
（1）稀釋（梯度稀釋）
（2）以該除草劑為唯一氮源  固  溶化  倒平板
（3）劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少（每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落）
（4）培養基中缺少這些細菌可利用的氮源  氮氣

點評 本題考查微生物培養的實驗，意在考查實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用及實驗分析能力．