Question

【題目】某個實驗小組對微生物的培養和五種香辛料提取的精油（編號為A、B、C、D、E）的抑菌能力進行了研究。首先制備了直徑相同的圓濾紙片若干，滅菌后分別放入各組精油中浸泡處理。然后取各種待測菌懸液0．15 mL分別在相應的固體培養基上均勻涂布，制成含菌平板。再取浸泡過精油的濾紙片貼在含菌平板上，每個培養皿貼浸過同一種精油的濾紙3片，放培養箱中培養一定時間。測定抑菌圈直徑，結果取三次重復實驗的平均值，其數據如表所示（單位：mm）。請分析回答：

（1）從香辛料植物中提取精油的方法有：__________。

（2）在微生物培養過程中，獲得純凈培養物的關鍵是防止_________，不同微生物培養時pH的要求往往不同，培養大腸桿菌和白葡萄球菌時需將培養基pH調至___。

（3）實驗使用涂布器接種，接種前涂布器的滅菌方法為_________，接種后將培養基放置在培養箱中_____（填“需要”或者“不需要”）振蕩培養。

精油種類 抑菌圈直徑（mm） 菌種	A	B	C	D	E
大腸桿菌	21．1	26．0	15．1	24．0	23．2
白葡萄球菌	14．7	22．0	19．1	12．0	29．1
黑曲霉	24．6	33．0	26．0	24．5	49．6
青霉	25．3	38．2	24．3	25．1	42．8

?

（4）培養一定的時間后，可根據不同微生物在固體培養基上形成的菌落的________（答出2項即可）等特征區分不同的微生物。

（5）根據實驗結果，不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同，其中精油______對真菌的殺傷作用最強。該實驗還缺少一組空白對照，請嘗試補充：______________。

Answer 1

【答案】蒸餾、壓榨和萃取??? 外來雜菌的入侵（雜菌污染）??? 中性或微堿性??? 沾取酒精，引燃??? 不需要??? 形狀、大小、隆起程度、顏色??? E??? 增加一組未用精油浸泡的濾紙片進行實驗???

【解析】

1、植物芳香油的提取方法：蒸餾法、萃取法和壓榨法等。?
（1）蒸餾法：芳香油具有揮發性。把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發性較強的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據蒸餾過程中原料放置的位置的標準，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。?
（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點的有機溶劑中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點的溶劑，剩下的就是芳香油。?
（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法。

2、在探究精油對微生物的抑菌能力時，實驗用的培養基中需要加入瓊脂，使液體培養基轉化成固體培養基，方便測量抑菌圈直徑。判斷精油的抑菌能力大小的指標是抑菌圈直徑大小，抑菌圈直徑大則說明精油的殺傷作用大。

（1）從香辛料植物中提取精油的方法有蒸餾、壓榨和萃取。

（2）在微生物培養過程中，防止外來雜菌的入侵是獲得純凈培養物的關鍵，不同微生物培養時pH的要求往往不同，培養大腸桿菌和白葡萄球菌時需將培養基pH調至中性或微堿性。
（3）涂布器的滅菌方法為將涂布器沾取酒精，在酒精燈的外焰引燃，待涂布器上的酒精燃燒完冷卻后進行涂布操作，接種后將培養基放置在培養箱中，由于是固體培養基因此不需要振蕩培養。
（4）菌落是鑒定不同微生物的主要特征，菌落的特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面，可根據不同微生物在固體培養基上形成的菌落的特征區分不同的微生物。
（5）根據實驗結果，不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同。分析表中數據可知，精油E對黑曲霉和青霉形成的抑菌圈大于其它種類的精油，所以精油E對真菌的殺傷作用最強。該實驗還缺少一組空白對照，由于該實驗的目的是研究五種香辛料提取的精油的抑菌能力，空白對照補充如下：增加一組未用精油浸泡的濾紙片進行的實驗，其它條件均相同。