Question

13．下列關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的敘述，正確的是（　　）

• A． 操作順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板
• B． 將稱好的牛肉膏用玻璃棒從稱量紙上挑取放入燒杯
• C． 待培養基冷卻至40℃左右時進行倒平板
• D． 培養基倒入培養皿后，立即將平板倒過來放置

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基：
（1）計算：依據是培養基配方的比例．
（2）稱量：牛肉膏比較黏稠，可同稱量紙一塊稱取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時動作要迅速，稱后及時蓋上瓶蓋．
（3）溶化：牛肉膏和稱量紙+水加熱取出稱量紙→加蛋白胨和氯化鈉→加瓊脂（注意：要不斷用玻璃棒攪拌，防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂）→補加蒸餾水至100mL．
（4）調pH；
（5）滅菌：培養基采用高壓蒸汽滅菌，培養皿采用干熱滅菌．
（6）倒平板．
2、培養基配制時的注意事項：
①全程要求無菌操作，無菌技術除了用來防止實驗室的培養物被其他外來微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培養基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板．可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶，當感覺到錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板．操作時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，以防止瓶口的微生物污染培養基．
③平板冷凝后皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可以使培養基表面的水分更好地揮發，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染．
④在倒平板的過程中，不能將培養基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生．

解答 解：A、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的操作步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，A正確；
B、將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，并加熱，B錯誤；
C、待培養基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，C錯誤；
D、培養基倒入培養皿后，待平板冷卻凝固約5～10min后，再將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿低在上，D錯誤．
故選：A．

點評 本題考查微生物的培養和分離，重點考查培養基的制備過程，要求考生識記培養基制備的具體步驟，掌握各步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確判斷各選項．