Question

家蠶細胞具有高效表達外源基因能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規模培養，可以提取干擾素用于制藥．
（1）進行轉基因操作前，需用

 

酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的

 

和

 

之間．
（3）采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經導入家蠶細胞．改PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、

 

和

 

．
（4）利用生物反應器培養家蠶細胞時，的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以

 

增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：解答本題從動物細胞培養、基因表達載體的組成、PCR技術所需條件等知識點著手考慮．

解答： 解：（1）為了使組織分散開為單個細胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶．
（2）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因．啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．
（3）PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和一對DNA引物；在PCR反應過程中，有一個環節是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用讓引物結合到互補DNA鏈上，形成局部雙鏈．
（4）利用生物反應器培養家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 
（2）啟動子 終止子 
（3）TaqDNA聚合酶   對干擾素基因特異性的DNA引物對  
（4）增大細胞貼壁生長的附著面積

點評：本題考查基因工程、細胞工程等相關知識，著重識記動物細胞培養和PCR技術的有關內容，意在考查考生的識記能力和應用能力，屬于容易題．