Question

13．海棲熱袍菌生活在55～90℃的海底火山口處水域，其產生的乳酸脫氫酶（LDH）具有極強耐熱性．研究人員利用基因工程技術生產該酶以用于工業制備NAD⁺（一種輔酶），基本技術流程如圖．請回答：

（1）過程①中，應提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時根據LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物，過程①中使用的工具酶為Taq酶
（2）進行過程③前，利用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞．
（3）過程④中，應將大腸桿菌置于42℃條件下誘導培養；然后提取大腸桿菌的蛋白質進行檢測，以鑒定目的基因是否成功表達，此方法稱為抗原-抗體雜交法．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①表示獲取目的基因的過程，②表示基因表達載體的構建過程，③表示將目的基因導入受體細胞的過程，④表示目的基因的檢測和表達．

解答 解：（1）分析過程圖可知，過程①是利用PCR技術擴增目的基因，應提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時根據LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物，該過程①中使用的工具酶為耐高溫的Taq酶．
（2）過程③是將目的基因導入受體細胞，需利用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞．
（3）過程④是目的基因的檢測與鑒定，根據42℃條件下啟動子活性完全激發的特點，應將大腸桿菌置于42℃條件下誘導培養；然后提取大腸桿菌的蛋白質進行檢測，以鑒定目的基因是否成功表達，此方法稱為抗原-抗體雜交法．
故答案為
（1）海棲熱袍菌     LDH（或目的）    Taq酶    
（2）Ca²⁺（或CaCl₂）
（3）42℃蛋白質     抗原-抗體雜交法

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確答題．