Question

17．請(qǐng)回答下列與微生物有關(guān)的問題：
（1）土壤中具有分解尿素的細(xì)菌，此類細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，該酶能將尿素分解成NH₃和CO₂（或“氨氣和二氧化碳”）．
（2）為從富含尿素的土壤中分離獲得尿素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基 （成分見下表）：

	KH2PO4	NaH2PO4	MgSO4•7HO	葡萄糖	瓊脂	尿素	水
甲	+	+	+	+	-	+	+
乙	+	+	+	-	+	+	+

注：“+”表示有，“-”表示無
培養(yǎng)基甲不能（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別尿素分解菌，原因是液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落；培養(yǎng)基乙不能（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別尿素分解菌，原因是培養(yǎng)基中沒有葡萄糖，不能為細(xì)菌提供碳源．
（3）如分別取0.1mL已稀釋10²倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、370，則每升原水樣中該細(xì)菌數(shù)為1.58×10⁸．
（4）純化細(xì)菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）某小組采用平板劃線法分離某樣本的該細(xì)菌．在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（答案合理可得分）．
（6）尿素分解菌在-20℃長期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“石蠟”“蒸餾水”或“甘油”）．

Answer 1

分析 1、如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，PH增高，使指示劑變紅色．
2、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．

解答 解：（1）土壤中具有分解尿素的細(xì)菌，此類細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，該酶能將尿素分解成NH₃和CO₂（或“氨氣和二氧化碳”）．
（2）分析表格可知，培養(yǎng)基甲中沒有加入瓊脂作為凝固劑，屬于液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落，即培養(yǎng)基甲不能用于分離和鑒別尿素分解菌；培養(yǎng)基乙中沒有葡萄糖，不能為細(xì)菌提供碳源，因此也不能用于分離和鑒別尿素分解菌．
（3）稀釋涂布平板法中，一般選擇30～300個(gè)菌落的進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此一般每升原水樣中該細(xì)菌數(shù)：（161+155+158）÷3÷0.1×1000×10²=1.58×10⁸個(gè)．
（4）純化細(xì)菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由于抗生素能夠殺死細(xì)菌（目的菌），因此不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）某小組采用平板劃線法分離某樣本的該細(xì)菌．在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（答案合理可得分）．
（6）尿素分解菌在-20℃長期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的甘油．
故答案為：
（1）NH₃和CO₂（或“氨氣和二氧化碳”）
（2）不能    液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落
不能    培養(yǎng)基中沒有葡萄糖，不能為細(xì)菌提供碳源
（3）1.58×10⁸
（4）高壓蒸汽滅菌     不可
（5）將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（答案合理可得分）
（6）甘油

點(diǎn)評(píng) 本題以表格為載體，主要考查微生物培養(yǎng)基的制作和目的微生物的篩選與分離，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記與理解．