Question

19．馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無機鹽，我國已將馬鈴薯作為主糧產品進行產業化開發．圖是轉基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，請分析回答問題：
（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細胞研磨液中提取抗鹽基因的mRNA來合成cDNA．
（2）如圖構建基因表達載體時，最好選用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質粒，不能使用Smal切割的原因是SamⅠ會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因．構建好的重組質粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是一段有特殊結構的DNA片段．
（3）將基因表達載體導入農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上）．通過農桿菌的轉化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩定維持和表達．
（4）如圖轉基因抗鹽馬鈴薯培育過程中，屬于脫分化階段的是⑤（填序號）．從個體水平上檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示轉基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，其中①表示獲取目的基因的過程，②表示切割質粒的過程，③表示基因表達載體的構建過程，④表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，⑤表示脫分化過程，⑥表示再分化過程．

解答 解：（1）獲取目的基因時，可以以mRNA為模板逆轉錄合成cDNA．
（2）用SamⅠ酶切割會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因，因此構建基因表達載體時不能用SamⅠ酶；因此，為了防止目的基因或質粒自身環化，在構建基因表達載體時，最好選用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質粒．啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，是RNA聚合酶結合的部位．
（3）將基因表達載體導入農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上）．通過農桿菌的轉化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩定維持和表達．
（4）圖中⑤屬于脫分化階段．從個體水平上檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長．
故答案為：
（1）mRNA
（2）EcoRⅠ和HindⅢSamⅠ會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因       DNA
（3）T-DNA是可以轉移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上）       穩定維持和表達
（4）⑤將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確答題．