Question

17．下面是將某細菌的基因A導入大腸桿菌內，制備“工程菌”的示意圖．請據圖回答：

（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉錄酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據目標蛋白質的氨基酸序列，推測出相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過化學方法合成所需基因．
（2）由A和載體B拼接形成的C通常稱為基因表達載體，其組成除了目的基因、啟動子外，還需要終止子、標記基因．
（3）利用PCR技術擴增DNA時，需要在反應體系中添加的有機物質有引物、（目的基因或A基因）模板、4種脫氧核苷酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將某細菌的基因A導入大腸桿菌內，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運載體（質粒），C為重組質粒，D為受體細胞．

解答 解：（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉錄酶的催化下，合成合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據目標蛋白質的氨基酸序列，推測出相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過人工合成（化學）方法合成所需基因．
（2）構建基因表達載體時，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次還需要用DNA連接酶連接目的基因與運載體形成基因表達載體；基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子和終止子等．
（3）利用PCR技術擴增DNA時所需的條件：引物、模板DNA（目的基因或A基因）、原料（4種脫氧核糖核苷酸）和耐熱性的DNA聚合酶等．
故答案為：
（1）DNA聚合酶    mRNA  脫氧核苷酸
（2）基因表達載體   終止子  標記基因  
（3）引物    （目的基因或A基因）模板

點評 本題結合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關細節，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．