Question

6．某同學在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在一起．請你完成分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實驗步驟，并回答有關問題：
（1）主要步驟：
①制備兩種培養基：一種是無氮培養基，另一種加青霉素的培養基．分別分成兩份，依次標上A、A′和B、B′，備用．
②分別向A、B培養基中接種混合菌．
③接種后，放在恒溫箱中培養3～4天．
④分別從A、B培養基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養基中．
⑤接種后，把A′、B′培養基放入恒溫箱中培養3～4天．
（2）回答問題：
第④⑤兩個步驟的目的是獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌．
在步驟①中，為保證無雜菌污染，實驗中應采用的主要措施有培養基高壓蒸氣滅菌、接種環在酒精燈火焰上滅菌、接種過程在酒精燈火焰附近進行．

Answer 1

分析 圓褐固氮菌（原核生物）與酵母菌（真核生物），在結構上的主要差異為圓褐固氮菌無成形的細胞核．
圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無氮培養條件下生長繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖．

解答 解：（1）將微生物進行分離一般采用選擇培養基．選擇培養基是在培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長．圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無氮培養基上生長繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖．根據這一原理可將兩種微生物分離開來．
（2）在微生物培養過程中的滅菌措施有：培養基和培養皿的高壓蒸氣滅菌、金屬用具的灼燒滅菌、接種過程在酒精燈火焰附近進行等．為獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌，可以用選擇培養基重復進行選擇培養．
故答案為：
（1）無氮   加青霉素   混合菌
（2）獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌    
培養基高壓蒸氣滅菌    接種環在酒精燈火焰上滅菌    接種過程在酒精燈火焰附近進行

點評 本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了微生物的分離與培養的相關知識，解答本題的關鍵是根據不同微生物的特點選擇恰當的培養基．