Question

7．地球上植物產生的纖維素中有40%～60%被土壤中的某些微生物利用，從土壤中分離并研究這些微生物有利于人們更有效地利用植物秸稈中的纖維素．請回答：
（1）分離纖維素分解菌，宜從富含纖維素的土壤中取樣．纖維素分解菌之所以能夠利用纖維素，是因為其細胞內含有纖維素酶．
（2）培養基應該以纖維素作為唯一碳源．除了碳源，培養基還應該含有氮源、水和無機鹽等．對配制好的培養基一般采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．
（3）纖維素分解菌純化培養中常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．在添加剛果紅的培養基上，可通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．
（4）經提取可獲得纖維素分解菌的各種蛋白質，要從這些蛋白質中分離出纖維素酶，可采用的方法有凝膠色譜法和電泳法．如果采用包埋法對該細菌進行固定，也可不經過酶的提取和分離等操作即可實現纖維素發酵．

Answer 1

分析 1、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．
3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等

解答 解：（1）分離纖維素分解菌，宜從富含纖維素的土壤中取樣．纖維素分解菌之所以能夠利用纖維素，是因為其細胞內含有纖維素酶，能將纖維素水解成葡萄糖．
（2）要從土壤中分離出能分解纖維素的微生物，所用的培養基應該以纖維素為唯一碳源；培養基中除含有碳源，還應該有氮源、水和多種無機鹽等．對培養基常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，目的是殺死細菌的芽孢，防止雜菌污染．
（3）纖維素分解菌純化培養中常用的接種方法的稀釋涂布平板法或平板劃線法．在添加剛果紅的培養基上，纖維素被分解后，剛果紅-纖維素復合物不能形成，培養基出現以纖維素分解菌為中心的透明圈．因此，可通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．
（4）纖維素酶的化學本質是蛋白質，從纖維素分解菌中提取纖維素酶，可采用凝膠色譜法和電泳法；如果采用包埋法對該細胞菌進行固定，也可不經過酶的提取和分離等繁操作即可實現纖維素發酵．
故答案為：
（1）富含纖維素        纖維素酶
（2）纖維素          氮源、水和無機鹽              高壓蒸汽滅菌
（3）平板劃線法和稀釋涂布平板法    透明圈
（4）凝膠色譜法和電泳法      包埋

點評 本題主要考查纖維素分解菌的篩選、鑒定和無菌操作的相關內容，意在提高學生無菌操作意識與加深相關知識點的識記與理解．