Question

3．請(qǐng)分析回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物科技方面的問(wèn)題：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，第三步是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，第四步是目的基因的檢測(cè)與鑒定．
①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）．
②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在熱穩(wěn)定性DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．
③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞后，培養(yǎng)該細(xì)胞再生成植株的過(guò)程中，往往需要使用植物激素，人為地控制脫分化和再分化過(guò)程．④蛋白質(zhì)工程的基本程序是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列．
（2）請(qǐng)回答下列有關(guān)單克隆抗體制備的問(wèn)題：
①與動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程相比，植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理．作用是去除細(xì)胞壁，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法是用聚乙二醇．
②經(jīng)人工誘導(dǎo)后，骨髄痛細(xì)胞和產(chǎn)生免疫反應(yīng)的動(dòng)物的脾臟細(xì)胞中的B淋巴細(xì)胞融合．由于可能產(chǎn)生多種融合細(xì)胞，因此還需對(duì)融合細(xì)胞用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，目的是選出雜交瘤細(xì)胞它的特點(diǎn)是既能迅速無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體．單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備．

Answer 1

分析 基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品．其基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．

解答 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，第三步是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，第四步是目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．
①第一步是目的基因的獲取需要限制性核酸內(nèi)切酶切割；第二步是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA．
②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．
③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞后，培養(yǎng)該細(xì)胞再生成植株的過(guò)程中，往往需要使用植物激素，人為地控制細(xì)胞的脫分化、再分化．
④蛋白質(zhì)工程的基本原理是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的序脫氧核苷酸．
（2）①植物體細(xì)胞雜交有植物組織培養(yǎng)過(guò)程和植物體細(xì)胞雜交過(guò)程．在細(xì)胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理．作用是去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，再用物理、化學(xué)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，常用的化學(xué)試劑用聚乙二醇．
②經(jīng)人工誘導(dǎo)后，骨髓瘤細(xì)胞和產(chǎn)生免疫反應(yīng)的動(dòng)物的脾臟細(xì)胞中的B淋巴細(xì)胞融合．由于可能產(chǎn)生多種融合細(xì)胞，因此還需對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選和檢測(cè)，用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，目的是選出雜交瘤細(xì)胞，它的特點(diǎn)是既能迅速無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體．單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備的特點(diǎn)．從而獲得符合要求的雜交細(xì)胞．
故答案為：
（1）目的基因的檢測(cè)與鑒定   ①限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）  ②熱穩(wěn)定性DNA聚合   ③脫分化    再分化 ④氨基酸     脫氧核苷酸
（2）①纖維素酶和果膠酶     細(xì)胞壁    聚乙二醇      ②選擇性培養(yǎng)基      雜交瘤細(xì)胞    既能迅速無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體  特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、蛋白質(zhì)工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)考查基因工程和細(xì)胞工程的操作步驟，要求考生識(shí)記基因工程和細(xì)胞工程的操作步驟及相關(guān)操作中采用的方法和需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．