Question

13．圖為利用生物技術獲得轉基因豬和轉基因煙草的過程（圖中數字表示過程或技術，字母表示物質或結構），據圖回答：

（1）為分離提純蘇云金芽孢桿菌，先用LB液體培養基進行擴大培養，再用劃線分離（涂布分離）方法進行分離，獲得一個個單獨的菌落．
（2）在研究過程中，采用PCR（聚合酶鏈式反應）技術對目的基因進行擴增，然后將目的基因與質粒等載體結合形成了重組質粒．在重組質粒的構建過程中需要的工具酶有限制性核酸內切酶和DNA連接酶．
（3）圖中②代表胚胎體外培養 技術．若培養C中的ES細胞，一般在培養皿底部制備一層胚胎成纖維細胞，目的是促進生長抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環境下用特定的酶處理D，可獲得原生質體．若將含有D的培養物放在搖床上，通過液體懸浮 培養可以分散成單細胞，這些單細胞具有胚性 細胞的特征．
（5）使用自然生長的煙草莖進行組織培養，需要依次在70%酒精和5%次氯酸鈉溶液中浸泡消毒．各種器皿和培養基等通常用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（6）從經特定免疫處理的豬中提取B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞 融合，形成雜交細胞，經篩選，克隆培養后，獲得的單一細胞的特征是既能產生特異抗體，又能無限增殖．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為利用生物技術獲得生物新品種的過程，其中①表示獲取目的基因的過程，則A為目的基因，B為重組DNA分子；②表示早期胚胎培養技術；③表示胚胎移植；④⑤表示植物組織培養過程，D表示愈傷組織，E表示胚狀體．

解答 解：（1）蘇云金芽孢桿菌可用LB液體培養基進行擴大培養；分離微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法，這樣可以獲得一個個單獨的菌落．
（2）PCR（聚合酶鏈式反應）技術可在體外大量擴增目的基因；構建基因表達載體時，首先需要用同種限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質粒．
（3）圖中②代表胚胎體外培養技術．若培養C中的ES細胞，一般在培養皿底部制備一層胚胎成纖維細胞，目的是促進生長抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環境下用特定的酶（纖維素酶和果膠酶）處理D，可獲得原生質體．若將含有D的培養物放在搖床上，通過液體懸浮培養可以分散成單細胞，這些單細胞具有胚性細胞的特征．
（5）使用自然生長的煙草莖進行組織培養，需要依次在70%酒精和5%次氯酸鈉溶液中浸泡消毒．各種器皿和培養基等通常用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（6）制備單克隆抗體時，將漿細胞與骨髓瘤融合，經篩選，克隆培養后，獲得既能產生特異抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞．
故答案為：
（1）LB液體     劃線分離（涂布分離）   菌落
（2）PCR （聚合酶鏈式反應）   限制性核酸內切酶和DNA連接酶
（3）胚胎體外培養       促進生長抑制分化
（4）甘露醇    液體懸浮   胚性
（5）5%次氯酸鈉     高壓蒸汽滅菌
（6）骨髓瘤細胞    既能產生特異抗體，又能無限增殖

點評 本圖結合圖解，綜合考查基因工程、細胞工程、胚胎工程及微生物的相關知識，要求考生識記相關工程技術的原理、操作步驟及應用；識記無菌技術，掌握分離微生物的兩種方法，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．