Question

回答下列有關遺傳信息傳遞表達和基因工程的問題．

?表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點．（1）限制酶Sma I和限制酶Xma I作用的相同點是

 

；不同點是

 

．
（2）研究發現復制原點的堿基序列特點通常含A、T堿基較多，其意義是

 

．
（3）在用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒時，需要對質粒進行改造，在質粒上構建新的限制酶切位點．首先用

 

酶處理質粒；然后用DNA聚合酶等處理質粒；再運用

 

酶處理質粒，從而形成新的限制酶切位點，即可被

 

酶識別．
?基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟．圖3表示運用影印培養法（使在一系列培養皿的相同位置上能出現相同菌落的一種接種培養方法）檢測基因表達載體是否導入大腸桿菌．
（4）培養基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養基A和培養基B分別還含有

 

、

 

．從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是

 

菌落中的細菌．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析表格：限制酶Sma I的識別序列是CCCGGG，在C和G之間切割；限制酶Xma I的識別序列是CCCGGG，在第一個C和第二個C之間切割．
分析圖1、圖2：質粒只有EcoR I酶和Pst I酶的識別位點，外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶識別位點，且切割獲得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶．
分析圖3：質粒上含有兩個抗性基因，即四環素抗性基因和青霉素抗性基因．對質粒進行改造時，已將青霉素抗性基因破壞，所以含重組質粒的大腸桿菌能在含有四環素的培養基上生存，但在含有青霉素的培養基上不能生存．

解答： 解：（1）限制酶Sma I的識別序列是CCCGGG，在C和G之間切割；限制酶Xma I的識別序列是CCCGGG，在第一個C和第二個C之間切割．由此可見，這兩種酶的識別的序列相同，但切割位點不同．
（2）因為CG堿基對間有三個氫鍵，而AT堿基對間有兩個氫鍵，可見AT堿基對間氫鍵數少，這使DNA雙鏈解旋更容易，所以復制原點的堿基序列特點通常含A、T堿基較多．
（3）圖中質粒只有EcoR I酶和Pst I酶的識別位點，而切割目的基因需要Mse I酶和Pst I酶，所以需要對質粒進行改造，在質粒上構建新的限制酶切位點，即Mse I酶切位點．首先用EcoR I酶處理質粒；然后用DNA聚合酶等處理質粒；再運用DNA連接酶處理質粒，從而形成新的限制酶切位點，即可被Mse I酶識別．
（4）由圖可知，質粒上含有兩個抗性基因，即四環素抗性基因和青霉素抗性基因．對質粒進行改造時，已將青霉素抗性基因破壞，所以含重組質粒的大腸桿菌能在含有四環素的培養基上生存，但在含有青霉素的培養基上不能生存．所以圖中培養基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養基A和培養基B分別還含有四環素和青霉素，在含有四環素的培養基上能生存，在含有青霉素的培養基上不能生存的4和6菌落就是含有目的基因的菌落．
故答案：（1）識別的序列相同      催化反應的結果卻不同（切割位點不同）
（2）AT堿基對間氫鍵數少，使DNA雙鏈解旋更容易
（3）EcoRI      DNA連接       MseI
（4）四環素      青霉素（青霉素和四環素）     4和6

點評：本題結合圖表，考查基因工程的相關知識，意在考查考生分析圖表獲取有效信息的能力；理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論．