Question

18．
人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如圖：
（1）htPA基因與載體用同種限制性核酸內切酶切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體．檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交技術．
（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能處理，才具備受精能力．
（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定．利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性，胚胎分割用的胚胎是桑椹胚或者囊 胚．
（4）胚胎分割是無性生殖，這種技術的優勢是能短時間內獲得相同優良性狀的個體．

Answer 1

分析 DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
該基因工程需要對羊的性別進行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進行移植．

解答 解：（1）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體．檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術．
（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能處理，才具備受精能力．
（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性．胚胎分割選用的胚胎最好處于桑椹胚或者囊胚時期，因為全能性較高．
（4）胚胎分割是無性生殖，這種技術的優勢是能短時間內獲得相同優良性狀的個體．
故答案為：
（1）同種限制性核酸內切酶     DNA分子雜交
（2）超數排卵  獲能處理
（3）顯微注射法   性別鑒定    全能性    桑椹胚或者囊
（4）無性   能短時間內獲得相同優良性狀的個體

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進行胚胎移植；識記細胞全能性的概念等．要求考生具有扎實的基礎知識，難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的考查．