Question

20．人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環境造成污染．土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源．現對土壤中的這類細菌進行分離實驗，請回答下列問題：
（1）分離培養細菌時必須進行無菌操作，包括培養基和各種器皿都必須是無菌的，培養基常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌．
（2）將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養．在稀釋土壤溶液的過程 每一步都要在酒精燈火焰旁旁進行操作．接種后的培養皿倒置于37℃的恒溫培養箱中培養．
（3）用含有酚紅指示劑的培養基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養基屬于選擇  培養基．若培養基中存在有分解尿素的細菌，其菌落周圍會出現紅色環帶，這是由于尿素被分解產生的氨使pH升高，酚紅指示劑產生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區域越大，表明該菌株利用尿素的能力越強．
（4）與全營養培養基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養基中菌落數B．
A．多        B．少        C．相等        D．幾乎為零．

Answer 1

分析 （1）培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．分為液體培養基和固體培養基．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
（3）培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（4）選擇培養基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養物質和環境不同．有的適于酸性環境，有的適于堿性環境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養基中加入10%的酚數滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養酵母菌和霉菌，可在培養基中加入青霉素；培養金黃色葡萄球菌，可在培養基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌，灼燒滅菌，干熱滅菌．其中培養基常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌．
（2）為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁操作，為防止水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴，在恒溫培養箱中培養皿需要倒置培養．
（3）用含有酚紅指示劑的培養基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養基屬于選擇 培養基．尿素被分解成氨可使PH呈堿性，變色區域越大，說明分解能力越強；以尿素為氮源的培養基中菌落數少，因為其他微生物不能在該環境中生存．
（4）以尿素為氮源的培養基中菌落數少，因為其他微生物不能在該環境中生存．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌
（2）酒精燈火焰旁     倒置      恒溫培養箱
（3）選擇      氨     越強       
（4）B

點評 本題主要考查尿素分解菌的分離及微生物的滅菌方法等知識點，意在加強學生實驗的無菌操作意識，提高實驗技能．