Question

將PVY病毒外殼蛋白基因（PVY-CP）導人馬鈴薯，并使之表達即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯．圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，PVY-CP可以從質粒A中獲取；質粒B是選用的運載體，另已知部分限制酶識別序列和切割位點：

BamH I	HindⅢ	BglII	Sma I
G↓GATCC CCTAG↑G	A↓ACCTT TTCGA↑A	A↓GATCT TCTAG↑A	CCC↓GGG GGG↑CCC

請結合圖象，運用所學知識回答問題：
（1）含有PVY-CP的質粒A保存在某細菌群體中，各個細菌含有相關不同的基因，這樣的細菌群體稱為

 

．
（2）關于步驟②中Klenow酶的猜測，合理的是

 

．
A．催化合成的片段起引物作用       B．可以將DNA片段的粘性末端變成平末端
C．能催化DNA鏈的合成             D．與DNA連接酶的功能相同
（3）步驟④中應該使用的限制酶是

 

．
（4）利用農桿菌轉化法進行轉化，首先需要將質粒C導人

 

中，進而轉化馬鈴薯，然后通過

 

技術獲得抗PVY病毒馬鈴薯苗，最后進行相關的鑒定．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,植物培養的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，步驟①～③是從質粒A中獲取目的基因（PVY-CP）的過程；質粒B是選用的運載體；④過程需要用限制酶處理質粒B；⑤表示基因表達載體的構建過程，該過程需要DNA連接酶．

解答： 解：（1）將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導入受體菌的群體中儲存，各受體菌分別含有這種生物的不同的基因，這個受體菌群稱為基因文庫．
（2）由圖可知，步驟②中用Klenow酶處理后，黏性末端變成平末端，說明Klenow酶能催化DNA鏈的合成，從而將DNA片段的粘性末端變成平末端．故選：BC．
（3）經過步驟③后，目的基因（PVY-CP）的一側是BamH I切割形成的黏性末端．目的基因（PVY-CP）的另一側是平末端，表中只有SmaⅠ切割后形成的是平末端．綜上可知，步驟④中應該使用的限制酶是BamH I、SmaⅠ．
（4）利用農桿菌轉化法進行轉化，首先需要將質粒C導人農桿菌中，再用農桿菌感染馬鈴薯，進而轉化馬鈴薯；將馬鈴薯細胞培養成馬鈴薯植株還需要采用植物組織培養技術．
故答案為：
（1）基因文庫（或部分基因文庫）
（2）BC
（3）BamH I、SmaⅠ
（4）農桿菌植物組織培養

點評：本題結合圖表，考查基因工程、植物組織培養，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能分析流程圖，從中獲取有效信息準確判斷第（2）題；能分析表格，明確BglⅡ和BamHI切割后形成的黏性末端相同；識記植物組織培養技術的過程及應用．