Question

13．根據現代生物技術的相關知識，回答下列問題：
（1）當糖源充足或缺少糖源時，醋酸菌分別能將葡萄汁中的糖和乙醇物質最終轉變成醋酸．
（2）為了分離和計數土壤中分解尿素的細菌，配制如下培養基進行實驗：

KH2PO4	Na2HPO4	MgS04•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	H2O
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g	lOOOmL

若在上述培養基中加入酚紅指示劑，該培養基能對培養的細菌起到選擇和鑒定的作用．若取土樣4g，應加入36 ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細菌密度很大，需要不斷加以稀釋，將104-107倍的稀釋液分別吸取0.2mL加人到固體培養基上，在對位稀釋倍數為106的培養基中統計3個平板上的菌落數分別為：219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數為1.15xl0⁹（小數點后保留一位小數）．
（3）若為了獲得更多青蒿素，霱將青蒿離體的細胞或組織培養成愈傷組織．青蒿的細胞分裂、組織分化能力比菊花困難一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化．若上述培養基用來進行青蒿細胞、組織的組織培養，還應加入的具體植物激素是生長素和細胞分裂素．
（4）若在青蒿素的提取過程中需用果膠酶，探究果膠酶最適用量時的自變量是酶用量的梯度．
（5）若用凝膠色譜柱分離果膠酶大分子蛋白質時，果膠酶在色譜柱中移動的速度是快速．
（6）胡蘿卜素粗品用紙層析法進行鑒定，鑒定過程中需用胡蘿卜素標準樣品作為對照．

Answer 1

分析 1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養需氧型．果醋制作的原理：
當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸．
2、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，計數的關鍵是經梯度稀釋后的學生倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數．
3、凝膠色譜法分離蛋白質的原理：凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離．

解答 解：（1）當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸．
（2）培養基是為了分離和計數土壤中分解尿素的細菌，因此在上述培養基中加入酚紅指示劑，該培養基能對培養的細菌起到選擇和鑒定的作用．實驗要求稀釋10倍，因此菌液和水的比例應為1：9，即取土樣4g，應加入36 ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．在對位稀釋倍數為10⁶的培養基中統計3個平板上的菌落數分別為：219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數為=（219+212+256）÷3×10⁶÷0.2=1.15xl0⁹．
（3）植物組織培養過程中，培養基中還應加入的具體植物激素是生長素和細胞分裂素．
（4）若在青蒿素的提取過程中需用果膠酶，探究果膠酶最適用量時的自變量是酶用量的梯度．
（5）若用凝膠色譜柱分離果膠酶大分子蛋白質時，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離．
（6）胡蘿卜素粗品用紙層析法進行鑒定，鑒定過程中需用胡蘿卜素標準樣品作為對照．
故答案為：
（1）葡萄汁中的糖和乙醇
（2）選擇和鑒定     36    1.15xl0⁹
（3）生長素和細胞分裂素
（4）酶用量的梯度
（5）快速
（6）紙層析    胡蘿卜素標準樣品

點評 本題綜合考查生物技術實驗專題的相關知識，意在強化學生微生物實驗操作遵循的原則及其運用．