Question

分析回答下列有關生物技術的問題抗體的制備經歷了細胞學層面和分子學層面兩個合成途徑的研究．如圖1是生物學技術制備抗體的兩個途徑模式簡圖．

（1）在獲取抗體之前，需要向健康人體注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重復注射一次，重復注射的目的是

 

．免疫學稱細胞A為

 

，該細胞的免疫作用被稱為

 

免疫．
（2）過程①至②獲所取的抗體稱為

 

，其中Y細胞稱為

 

．
（3）③至⑥流程獲取抗體的技術稱為

 

技術．過程⑤需要限制性內切酶，還需要

 

酶．V1基因體外擴增的技術一般簡稱為

 

．
用限制酶EcoRV單獨切割該普通質粒，可產生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRV、Mbol聯合切割同一種質粒，得到三種長度的DNA片段，見圖2，其中*表示EcoRV限制酶切割的一個粘性末端．
（4）若Mbol限制酶獨立切割該普通質粒，則可以產生的長度為

 

的DNA片段．
（5）EcoRV限制酶切割普通質粒的切割位點如圖3，*為切割點．請在答題卡的圖上的大致位置上也用箭頭標出Mbol限制酶的酶切位點，并標示相應片段長度．
基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟．若圖4中箭頭表示大腸桿菌質粒的相關基因與限制酶的酶切位點．圖5示意有關限制酶在DNA分子中的具體切點．圖6表示運用影印培養法（使在一系列培養皿的相同位置上能出現相同菌落的一種接種培養方法）檢測基因表達載體是否導入大腸桿菌．

限制酶	MseI	PstI	EcoRI	SmaI	XmaI
識別序列及切割位點

（6）培養基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養基A和培養基B分別還含有

 

、

 

．從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是

 

菌落中的細菌．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程,基因工程的應用

專題：

分析：據圖1分析，①表示人工合成目的基因；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體受體．
據圖2分析：該質粒共有堿基14kb，在質粒上有MboI酶的兩個切點，有EcoRV酶的一個切點．
根據圖4和圖5分析，目的基因導入的位點是抗青霉素基因，說明抗青霉素基因不能表達，而抗四環素基因能表達，細菌在含四環素的培養基能生長，在含青霉素的培養基上不能生長．

解答： 解：（1）向健康人體注射重復注射特定抗原（如乙肝疫苗，增加抗原數量，引起顯著免疫反應，抗體是由效應B細胞分泌，參與體液免疫．
（2）效應B細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，即能分泌特異性抗體，又能無限繁殖，進而產生單克隆抗體．
（3）③至⑥流程屬于轉基因技術，原理是基因工程．過程⑤基因表達載體的構建需要限制性內切酶和DNA連接酶．V1基因體外擴增的技術為（聚合酶鏈式反應），簡稱PCR技術，原理是DNA復制．
（4）從題目的已知條件看，該質粒共有堿基14kb，在質粒上有MboI酶的兩個切點，有EcoRV酶的一個切點，再根據二者共切后的片段分成情況，即可繪制出在質粒上兩種酶的切點．
（5）根據上題切割位點，去除EcoRV酶的一個切點，則Mbol限制酶獨立切割普通質粒，則可以產生的長度為8KB與6KB的DNA片段．
（6）培養基A中菌落不變，說明培養基中四環素，使得含有重組質粒和非重組質粒的受體細胞存活，則可能含有目的基因的受體細菌6個；培養基B中菌落4個，則培養基B中含有青霉素，使得重組質粒的受體細胞不能存活，含有目的基因的是2個細菌．
故答案為：（1）、增加抗原數量，引起顯著免疫反應    漿細胞（效應B淋巴細胞）        體液
（2）、單克隆抗體                雜交瘤細胞
（3）、轉基因技術      DNA連接酶     PCR技術    
（4）、8KB與6KB  
（5）
（6）、四環素   青霉素（青霉素和四環素）   2和6

點評：本題考查單克隆抗體的制備、基因工程等相關知識，意在考查學生圖文轉換能力，理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，能從材料中獲取相關的生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題．