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7.通過人.改造能使某種DNA病毒失去自我繁殖能力,但其DNA還能成功整合到宿主細胞染色體上,從而達到使用病毒做載體治療某些疾病的目的,下圖表示用這種病毒做載體治療白血病的過程.請分析回答:

(1)治療過程用到的生物技術有轉基因技術和細胞培養技術.
(2)人.工改造這種病毒載體時,通常要加裝標記基因,該過程用到的酶是限制酶和DNA連接酶,標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因.滅活的病毒在細胞工程中一般用于誘導動物細胞融合.
(3)細胞培養過程中,細胞表面相互接觸時會停止分裂,這種現象稱為細胞的接觸抑制.此時需要重新用酶處理,分瓶繼續培養,這樣的培養過程叫做傳代培養.
(4)該圖所示基因治療的方式叫做體外基因治療,這種治療方法不能(能、不能)解決后代遺傳問題.
(5)鑒定目的基因是否整合到細胞染色體上的方法是DNA分子雜交,若出現雜交帶,則表明已經成功整合.

分析 基因治療是將目的基因通過載體導入患者受體細胞形成重組受體細胞,體外培養后再輸回患者體內,或將目的基因通過載體直接送入患者體內.前者為體外途徑,后者為體內途徑.
進行基因檢測有兩個必要條件,一是必需的特異的DNA探針;二是必需的基因組DNA.當兩者都變性呈單鏈狀態時,就能進行分子雜交.

解答 解:(1)該基因治療過程中需對病毒載體進行基因改造并整合到人體DNA上,并在體外培養造血干細胞,故用到的生物技術有 轉基因技術  和 細胞培養技術.
(2)該病毒作為載體時,通常要加裝標記基因,故需對DNA進行切割和重新連接,故該過程用到的酶是限制酶和DNA連接酶,標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因.動物細胞融合中常用滅活的病毒作為誘導劑.
(3)動物細胞在培養瓶中分裂生長,隨著細胞的增多,細胞表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,這種現象叫接觸抑制;因此需要定期地用胰蛋白酶使細胞從瓶壁脫離下來,以便于分裝到更多的培養瓶中繼續培養,這樣的培養過程叫做傳代培養.
(4)該圖所示基因治療的方式叫做體外基因治療,由于該方法只是改造了造血干細胞的基因,而生殖細胞遺傳物質未改變,故這種治療方法不能解決后代遺傳問題.
(5)鑒定目的基因是否整合到細胞染色體上的方法是DNA分子雜交技術,通過和特定的分子探針雜交后,若出現雜交帶,則表明已經成功整合.
故答案為:
(1)轉基因技術  細胞培養技術 
(2)限制酶  DNA連接酶  鑒別受體細胞中是否含有目的基因  誘導動物細胞融合 
(3)接觸抑制  傳代培養 
(4)體外基因治療  不能 
(5)DNA分子雜交  雜交帶

點評 本題考查了基因工程應用的相關知識,屬于對識記、理解層次的考查,考生既要清楚基因診斷和基因治療的概念,又要區分二者的區別,可通過列表歸類比較.

練習冊系列答案
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①科學家把用放射性標記的氨基酸注入細胞中,發現放射性依次出現于:附有核糖體的內質網、分泌小泡、高爾基體、小囊泡、細胞膜;
②卡爾文向小球藻提供14C標記的CO2,并追蹤檢測其放射性,探明了暗反應的全過程;
③赫爾希和蔡斯利用32P和35S標記噬菌體侵染細菌的實驗中,采用了攪拌和離心等手段將DNA和蛋白質分開,再分別檢測其放射性;
④要證明DNA通過半保留的方式進行復制,可以將15N標記的細菌放在14N的培養基中培養一代后,再檢測后代DNA放射性的強弱.
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C.圖2①過程的完成需要限制酶和DNA連接酶的參與
D.圖2⑥可與多個核糖體結合,并可以同時翻譯出多種蛋白質

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12.凝乳酶是奶酪生產中的關鍵性酶.直接利用動、植物生產凝乳酶受多種因素限制,培育高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發展方向.用紫外線照射芽孢桿菌,分離、培養,并檢測各菌株所產生的凝乳酶活力.操作過程如圖1所示.請分析回答:

(1)圖1所示的b過程的目的是為獲得單個菌落,接種用的平板培養基不是(是/不是)選擇培養基.
(2)在一定溫度下(35℃),一定時間內(通常為40分鐘),凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個酶活力單位(U).凝乳酶活力檢測結果如圖2所示.
①據圖2所示,酶催化能力最強的是A6組.
②A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同,兩位同學對此做出了推測:
同學甲:A2、A5組芽孢桿菌未發生基因突變,而其他組發生的變化說明基因突變
具有不定向的特點.
同學乙:A2、A5組芽孢桿菌發生基因突變,但凝乳酶蛋白未改變,其依據的理由是一種氨基酸可能對應多種密碼子(基因突變發生在非編碼區).為了驗證上述2位同學的假設,可采用DNA分子雜交(DNA測序)技術檢測凝乳酶基因是否發生了突變.
(3)從牛胃液中分離到的凝乳酶以催化能力強而被廣泛應用,研究人員運用基因工程技術,將編碼該酶的基因轉移到了微生物細胞中.
①從牛胃細胞中提取mRNA,再逆轉錄形成cDNA.以此cDNA為模板PCR擴增目的基因.
②構建重組DNA分子(如圖3所示)最好選用BamHI和PstI限制酶.
③研究發現,如果將該凝乳酶20位和24位氨基酸改變為半胱氨酸,其催化能力將提高2倍.通過蛋白質工程生產高效凝乳酶,所需步驟有b、a、d、e(選擇對即可得分,不要求排序).
a.蛋白質的結構設計                  b.蛋白質的結構和功能分析
c.蛋白質結構的定向改造               d.凝乳酶基因的定向改造
e.將改造后的凝乳酶基因導入受體細胞     f.將定向改造的凝乳酶導入受體細胞.

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19.圖中的a、b、c、d分別表示細胞有絲分裂過程中染色體和DNA的復制和加倍過程,下列敘述錯誤的是(  )
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