Question

19．（1）微生物培養中，對培養基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．在植物組織培養的過程中，也要對外植體等進行一序列的消毒、滅菌處理，并且要求無菌操作，原因是外植體體積小、抗性差、微生物會與外植體爭奪培養基中的營養物質（至少答出兩點）．
（2）為了從樣本中獲取某種致病菌單菌落，可用平板劃線法或稀釋涂布法將樣本接種于固體培養基表面，再經過選擇培養、鑒別等步驟就可似獲得．
（3）根據培養基中出現的菌落數目和稀釋倍數計算出細菌數目往往比實際的數目低，原因是當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．
（4）為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇（填“選擇”或“鑒別”）培養基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．

Answer 1

分析 1、植物組織培養的過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發育植株（新植體）．
2．實驗室常用的消毒方法
煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒．
3．實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
4、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．

解答 解：（1）微生物培養中，對培養基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．在植物組織培養的過程中，也要對外植體等進行一序列的消毒、滅菌處理，并且要求無菌操作，原因是外植體體積小、抗性差、微生物會與外植體爭奪培養基中的營養物質、微生物有可能產生對組織培養有害的物質等．
（2）為了從樣本中獲取某種致病菌單菌落，常見的接種方法有平板劃線法、稀釋涂布法將．
（3）細菌計數，由于兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此根據培養基上出現的菌落數目和稀釋倍數計算得出的數目往往比實際數目低．
（4）為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌      外植體體積小、抗性差；微生物會與外植體爭奪培養基中的營養物質；微生物有可能產生對組織培養有害的物質（任意答出兩條即可）
（2）平板劃線       稀釋涂布
（3）當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
（4）選擇     酚紅      紅

點評 本題主要考查植物組織培養技術、消毒和滅菌的方法、接種方法等知識，意在強化學生對相關實驗操作的識記、理解與運用．