Question

17．Bt毒蛋白基因是應用最為廣泛的抗蟲基因．請回答下列有關轉基因抗蟲植物的問題：
（1）要從蘇云金芽孢桿菌中獲取Bt毒蛋白基因，可根據Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設計特異性引物（對），再利用PCR技術擴增出Bt毒蛋白基因．
（2）構建重組質粒時，常用Ti質粒作為載體，是因為Ti質粒上具有T-DNA（可轉移的DNA），它能把目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上．這種將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法．
（3）若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產生了相應毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測．要確定抗蟲基因導入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體生物學水平上還需要做抗蟲接種實驗．
（4）目前，轉基因植物的安全性問題是社會爭論的熱點．面對轉基因技術的利弊，我們應持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�、诨�因表達載體的構建③將目的基因導入受體細胞④目的基因的檢測與鑒定．
2、目的基因的檢測與鑒定
（1）分子水平上的檢測  
  ①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術
  ②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術
  ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答 解：（1）要在體外大量擴增目的基因可利用PCR技術，該技術需要引物，即根據Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設計特異性引物（對）．
（2）農桿菌轉化法的原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．
（3）若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產生了相應毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測；要確定抗蟲基因導入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做抗蟲接種實驗．
（4）面對轉基因技術的利弊，我們應持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．
故答案為：
（1）引物（對）   PCR
（2）T-DNA（可轉移的DNA）　  染色體DNA     農桿菌轉化
（3）抗原-抗體雜交    抗蟲接種
（4）趨利避害，不能因噎廢食

點評 本題考查了基因工程的有關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；區分識記目的基因導入受體細胞的不同方法；掌握目的基因檢測與鑒定的方法；明確抗蟲植物研究的生態學意義．