Question

2．請回答與微生物分離和培養有關的問題：
（1）稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是①②④③（填序號）．為減少誤差，在設置平板是一般要3個或以上數目平板；若統計出在稀釋倍數為10⁵的平板上的平均菌落數為30個，所用稀釋液的體積為0.2ml，則每克樣品中的菌落數為1.5×10⁷個．
①土壤取樣
②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液
③吸取0.1mL溶液進行涂布平板
④依次稀釋至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀釋度
（2）無菌技術主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染．其中對培養基進行滅菌的常用方法分別是高壓蒸汽滅菌；要求實驗操作應在酒精燈火焰旁進行，以避免周圍環境中微生物的污染．
（3）如圖是某同學對萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實驗的結果．圖中實驗組是B、C，實驗得出的結論是萃取樣品中不含β-胡蘿卜素．

Answer 1

分析 自然界中目的菌株的篩選的依據是根據它對生存環境的要求，到相應的環境中去尋找．實驗室中目的菌株的篩選的原理是利用選擇培養基人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．
微生物的滅菌方法主要有高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌和灼燒滅菌．接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答 解：（1）分離純化土壤微生物的正確的操作步驟：①土壤取樣，②制備土壤溶液，④制備土壤樣品稀釋液，③涂布平板分離．所以正確的操作順序是①②④③．為減少偶然誤差，在設置平板是一般要3個或以上數目平板；根據公式可知每克樣品中的菌落數為：30÷0.2×10⁵=1.5×10⁷個．
（2）微生物培養中，培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，培養皿等器具可以使用干熱滅菌．為避免雜菌污染，接種時需要在酒精燈火焰旁進行．
（3）據圖分析：A、D兩點不是標準樣品的點樣位置，B、C兩點不是實驗樣品的點樣位置，圖中實驗組色素開始的終點與標準樣品不一致，所以樣品中不含β-胡蘿卜素．
故答案為：
（1）①②④③3個   1.5×10⁷個
（2）高壓蒸汽滅菌    酒精燈火焰旁
（3）B、C   萃取樣品中不含β-胡蘿卜素

點評 本題主要考查微生物的培養、篩選與分離，意在強化學生對相關知識的理解與運用，題目難度中等．