Question

15．單克隆抗體可用于疾病診斷和治療，制備H7N9病毒單克隆抗體的流程如圖：

（1）過程③常用的方法是顯微注射．
（2）向小鼠體內注射抗原蛋白，使小鼠產生體液免疫．從小鼠體內分離的細胞I是B細胞（或漿細胞或已免疫的B細胞），細胞II應具有的特點是既能無限增殖，又能產生特異性抗體．
（3）體外培養細胞II，首先應保證其處于無菌、無毒的環境，其次需要提供充足的營養和適宜的溫度，通常需加入血清、血漿等天然成分；為了保證氣體環境，培養箱中的氣體組成為95%空氣加5%CO₂．
（4）細胞融合后需在選擇性（HAT）培養基篩選出細胞II，然后對細胞II還需進行的操作是克隆化培養和抗體檢測．
（5）若要預防H7N9禽流感，可用圖中的H7N9抗原蛋白作為疫苗．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．目的基因導入動物細胞的方法是顯微注射法．檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術．
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導經過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經篩選獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，通過培養獲得的雜交瘤細胞得到單克隆抗體．
3、動物細胞培養需要滿足以下條件
（1）充足的營養供給--微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等．
（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（3）無菌、無毒的環境：培養液應進行無菌處理．通常還要在培養液中添加一定量的抗生素，以防培養過程中的污染．此外，應定期更換培養液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害．
（4）氣體環境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養液的pH．

解答 解：（1）將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）向小鼠體內注射抗原蛋白，使小鼠產生相應的漿細胞，這是體液免疫，從小鼠體內分離的細胞Ⅰ是B細胞（漿細胞或已免疫B細胞），將無限增殖的基因導入漿細胞，得到的細胞Ⅱ應具有的特點是既能無限增殖，又能產生特異性抗體．
（3）體外培養細胞Ⅱ，首先應保證其處于的無菌無毒環境，其次需要提供充足的營養、適宜的溫度，為了保證營養充足，還需要在培養基中加入動物血清、血漿；為了保證氣體環境，培養箱中的氣體組成為95%空氣加5%CO₂．
（4）動物細胞融合后，需要用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；對于轉基因成功的細胞Ⅱ還要進行克隆化培養和檢測（專一）抗體．
（5）疫苗為毒性弱的抗原，因此要預防H7N9禽流感，可以用圖中的H7N9抗原蛋白作為疫苗．
故答案為：
（1）顯微注射
（2）體液    B細胞（或漿細胞或已免疫的B細胞）    既能無限增殖，又能產生特異性抗體
（3）無菌、無毒    血清、血漿    95%空氣加5%CO₂
（4）選擇性（HAT）    克隆化培養和抗體檢測
（5）H7N9抗原蛋白

點評 本題考查基因工程和單克隆抗體的制備有關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟；識記單克隆抗體制備的原理、過程，能結合圖中信息準確答題．