Question

9．某高校研發的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預防效果，其有效成分是一種該菌表面抗原蛋白質，請回答下列問題．
（1）根據表面抗原蛋白質的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進行人工合成，然后通過PCR技術技術大量擴增．
（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達載體，要利用DNA連接酶連接被限制酶切開的鍵．
（3）在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程．
（4）實驗證明，一定時間內間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內產生的記憶細胞數量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續時間更久．

Answer 1

分析 1、獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取：②利用PCR技術擴增：③人工合成：這種方法有兩條途徑，一是以目的基因轉錄的信使RNA為模板，反轉錄成互補的單鏈DNA，再在酶的作用下合成雙鏈DNA，即目的基因；另一條途徑是蛋白質的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結構基因的核苷酸序列，然后用化學的方法以單核苷酸為原料合成．
2、基因表達載體的構建的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因
（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質．
（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端．
（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素基因．
3、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程．

解答 解：（1）一種如人工合成法，根據蛋白質的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結構基因的核苷酸序列，進行人工合成目的基因．在用PCR技術體外大量擴增．
（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，需要用限制酶將目的基因和運載體切割磷酸二酯鍵，再用DNA連接酶連接形成重組DNA．
（3）在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程．
（4）一定時間內間隔口服該疫苗3次，屬于二次免疫反應，體內產生的記憶細胞數量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續時間更久．效果更好．
故答案為：
（1）脫氧核苷酸序列  PCR技術     
（2）構建基因表達載體   DNA連接酶
（3）RNA聚合酶              
（4）記憶

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握獲取目的基因的幾種方法，能根據題干要求準確判斷各選項，屬于考綱識記層次的考查．