Question

8．下列是某興趣小組探究酵母菌種群數量變化規律，做了如下實驗：
實驗器材與試劑：菌種、現制的（未滅菌）馬鈴薯培養液或肉湯培養液、試管、血球計數板（2mm×2mm方格）、滴管、顯微鏡等．
實驗步驟：
（1）取相同試管若干支，分別加入10mL肉湯培養液（或馬鈴薯培養液），分別標記1、2、3等．
（2）將酵母菌母液分別加入試管各10mL，搖勻后用血球計數板計數起始酵母菌個數（N₀），做好記錄．
（3）將各試管送進冰箱中培養7天．
（4）每天同一時間各組取出本組的試管，用血球計數板計數酵母菌個數，并作記錄，連續觀察7天．
實驗記錄及計算結果如表：（單位：個）

天數	1	2	3	4	5	6	7
觀察值						M6
計算值						N6

實驗探討：
（1）實驗步驟中有兩處錯誤，請指出并修改：
①缺少滅菌環節，在接種前應將裝有5mL肉湯培養液（或馬鈴薯培養液）塞上棉塞，經高壓蒸汽滅菌并冷卻后備用；
②不能在冰箱中培養，應置于適宜溫度下（比如28℃）培養；
（2）用血球計數板計數酵母菌個數時，取適量培養液后的操作是先將蓋玻片放到計數室上，將培養液滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行滲入．
（3）觀察值是血球計算板上若干方格內的酵母菌數的平均值，對于壓在一個方格界限上的酵母菌的處理方法是只計數相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數．如果計數時，蓋玻片下的培養液厚度為0.1mm，第6天吸取的培養液稀釋10倍時，進行計數時觀察值為M₆，請推導出10mL培養液中酵母菌的總數N₆約為2.5M₆×10⁵個．
（4）本探究實驗需要設置對照嗎？不需要，理由本實驗旨在探究培養液中酵母菌在一定條件下的種群數量變化，只要分組重復實驗，獲得平均數值即可．

Answer 1

分析 探究培養液中酵母菌種群數量與時間變化關系的實驗原理：
（1）酵母菌可以用液體培養基來培養，培養液中的酵母菌種群的增長情況與培養液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關，我們可以根據培養液中的酵母菌數量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數量的變化情況．
（2）利用血球計數板在顯微鏡下直接計數是一種常用的細胞計數法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數目，所以一般用于單細胞微生物數量的測定，由于血球計數板上的計數室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據在顯微鏡下觀察到的細胞數目來計算單位體積的細胞的總數目．

解答 解：（1）實驗步驟中有兩處錯誤：①缺少滅菌環節，在接種前應將裝有5mL肉湯培養液（或馬鈴薯培養液）塞上棉塞，經高壓蒸汽滅菌并冷卻后備用；②不能在冰箱中培養，應置于適宜溫度下（比如28℃）培養．
（2）用血球計數板計數酵母菌個數時，取適量培養液后的操作是先將蓋玻片放到計數室上，將培養液滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行滲入．
（3）觀察值是血球計算板上若干方格內的酵母菌數的平均值，對于壓在一個方格界限上的酵母菌應該只計數相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數．每個小方格的體積=2×2×0.1=0.4立方毫米，共有酵母菌10×M₆個細胞．10mL培養液中酵母菌的個數=10×1000×10×M₆÷0.4=2.5M₆×10⁵個．
（4）本實驗旨在探究培養液中酵母菌在一定條件下的種群數量變化，只要分組重復實驗，獲得平均數值即可，不需要設置對照實驗．
故答案為：
（1）①缺少滅菌環節，在接種前應將裝有5mL肉湯培養液（或馬鈴薯培養液）塞上棉塞，經高壓蒸汽滅菌并冷卻后備用
②不能在冰箱中培養，應置于適宜溫度下（比如28℃）培養
（2）先將蓋玻片放到計數室上，將培養液滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行滲入
（3）只計數相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數      2.5M₆×10⁵
（4）不需要       本實驗旨在探究培養液中酵母菌在一定條件下的種群數量變化，只要分組重復實驗，獲得平均數值即可

點評 本題難度適中，屬于考綱中理解、應用層次的考查，考生在解答過程中要善于利用單一變量的理念分析實驗表格，酵母菌數量的計算是考生的難點，在計算過程中要善于利用公式，平時練習過程中應加強此方面的訓練．