分析 基因工程技術的基本步驟:
(1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成.
(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等.
(3)將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同,導入的方法也不一樣.將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法.
(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等.
解答 解:(1)根據題意和圖示分析可知:圖1基因表達載體中已有目的基因、啟動子和標記基因,所以沒有標注出來的基本結構是終止子.
(2)圖1中啟動子是RNA聚合酶酶識別和結合的部位,有了它才能啟動目的基因的表達即轉錄過程;氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標記基因,將含有重組質粒的大腸桿菌篩選出來.
(3)構建基因表達載體的過程中,必須用相同的限制酶切割(含目的基因的外源DNA分子)和運載體,以產生相同的黏性末端,再加入DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子.
(4)β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達,可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,這樣可以防止胰島素的A、B鏈被菌體內蛋白酶降解.
(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,由于β-半乳糖苷酶中含有多個甲硫氨酸,而胰島素的A、B鏈中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰處理相應的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β-半乳糖苷酸被切成多個肽段.
(6)由于一個肽鏈中至少有一個游離的氨基和一個游離的羧基,在肽鏈內部的R基中可能也有氨基和羧基,而胰島素含有A鏈和B鏈,所以每個胰島素分子中所含游離氨基的數量至少是2個.
(7)分析題意可知,限制酶A和B在質粒上均只含有一個切割位點,限制酶C在質粒上有2個切割位點.由于B和C同時切割得2個250bp和1個3166bp片段,說明限制酶B的切點在限制酶C的兩個短距離的切點之間,因此若以A的切割位點為計算起點,則B的切割位點與A點最短長度=500+250=750bp,則畫圖可知C的兩個切割位點與A點的最短距離分別為500bp、1000bp.
(8)分析圖解可知,限制酶SmaI能識別如圖3的「5‘-CCCGGG-3’」6個堿基序列,并在中央切斷DNA形成的平末端,因此它的切割位點為C和G之間.
故答案為:
(1)終止子
(2)RNA聚合 作為標記基因,將含有重組質粒的大腸桿菌篩選出來
(3)限制酶和DNA連接酶
(4)防止胰島素的A、B鏈被菌體內蛋白酶降解
(5)β-半乳糖苷酶中含多個甲硫氨酸,而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸
(6)至少2個 兩條肽鏈的一端各有一個游離的氨基,氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基
(7)750bp 500bp 1000bp
(8)
點評 本題結合圖解,考查基因工程的相關知識,要求考生識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟,掌握各步驟中的相關細節,能結合圖中信息準確答題,屬于考綱識記和理解層次的考查.
科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | ①② | B. | ②④ | C. | ①③ | D. | ③④ |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 葉綠體色素濾液細線浸入層析液,可導致濾紙條上色素帶重疊 | |
B. | 低溫誘導大蒜根尖時間過短,可能導致難以觀察到染色體加倍的細胞 | |
C. | 鑒定待測樣液中的蛋白質時,先加CuS04溶液,振蕩后再加NaOH溶液 | |
D. | 將洋蔥表皮放入0.3g/ml蔗糖溶液中,水分交換平衡后制成裝片觀察質壁分離過程 |
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 互補鏈中的胞嘧啶占該互補鏈堿基總數的31% | |
B. | 若該DNA分子有400個堿基,連續復制兩次,則需要游離的腺嘌呤脫氧核苷酸240個 | |
C. | DNA分子中的嘌呤數與嘧啶數不相等 | |
D. | 該DNA分子中鳥嘌呤占所有堿基總數的50% |
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | ①表示種群的基因型頻率改變,②表示可遺傳的變異,為生物進化提供原材料 | |
B. | 所有物種的形成都要經過長期的地理隔離,并逐步形成生殖隔離 | |
C. | 進化導致生物多樣性形成,④表示基因多樣性和物種多樣性 | |
D. | ③表示自然選擇學說,其中自然選擇決定生物進化的方向 |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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