Question

13．將毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因導入絨山羊，能提高羊絨的質量．
（1）轉基因常用的運載工具除了質粒外，還可以使用動植物病毒．
（2）為獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊，先將KIFⅡ基因轉入羊胎兒皮膚成纖維細胞中，使其結合到細胞核的染色體上．培養轉基因成纖維細胞，培養液需添加抗生素以維持無菌狀態．細胞很快的貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．生長到一定階段，細胞因發生接觸抑制而停止生長，可使用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理，然后繼續分瓶培養．
（3）取培養的轉基因成纖維細胞注入去核的MII期卵母細胞，獲得重組細胞，經激活使其分裂發育成早期胚胎．一般情況下，動物早期胚胎培養到囊胚或桑葚（椹）胚時期，可進行胚胎移植．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
2、動物細胞培養的條件：（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物．
（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養液的PH）．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）基因工程常用的工具包括質粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物．
（2）為獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊，先將KIFⅡ基因轉入羊胎兒皮膚成纖維細胞中，使其結合到細胞核的染色體上．動物細胞培養時，培養液需添加抗生素以維持無菌狀態．動物細胞培養過程中，細胞很快的貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．生長到一定階段，細胞因發生接觸抑制而停止生長，可使用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理，然后繼續分瓶進行傳代培養．
（3）取培養的轉基因成纖維細胞注入去核的MII期卵母細胞，獲得重組細胞，經激活使其分裂發育成早期胚胎．一般情況下，動物早期胚胎培養到囊胚或桑葚（椹）胚時期，可進行胚胎移植．
故答案為：
（1）動植物病毒   
（2）染色體   抗生素   細胞貼壁    接觸抑制    胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（3）MII期卵母細胞   囊胚或桑葚（椹）胚

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具；識記動物細胞培養的過程及條件；識記胚胎移植的基本程序，能結合所學的知識準確答題．