Question

10．微生物與人類關系密切．雖然有些微生物能使動植物患病，但多數微生物對人類是有益的．請回答下列問題：
（1）培養微生物的培養基配方中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽．從土壤中分離分解尿素的細菌時，培養基中加的唯一氮源為尿素，這種培養基稱為選擇培養基．
（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的倒平板操作時，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落入培養皿造成污染，還可使培養基表面的水分更好地揮發．
（3）微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．在用平板劃線法接種時，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環第一步灼燒接種環是防止接種環上有其他微生物而污染培養基．每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落．
在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環嗎？為什么？劃線結束后仍要灼燒接種環以免菌種對環境造成污染．

Answer 1

分析 1、選擇培養基：根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．3、劃線分離操作中的有關問題：
（1）在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環，在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環．

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結束灼燒
目的	避免接種環上可能存在的微生物污染培養基	殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種	殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環之后，要等其冷卻后再進行劃線，以免接種環溫度太高，殺死菌種．
③在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線．每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落．
（2）進行恒溫培養時，要將培養皿倒置的原因如果正放培養皿，則皿蓋上形成的水滴會落入培 養基表面并且擴散開．如果培養皿中已形成菌落，則茵落中的細菌會隨水擴散，菌落間相互影響，很難再分成單菌落，達不到分離的目的．因此恒溫培養時，培養皿必須倒置．
（3）培養后判斷是否有雜菌污染的方法
①從菌落的形態看，是否濕潤、透明、黏稠，呈何種顏色等等，是區別細菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關鍵指標．
②用顯微鏡鏡檢觀察其形態、大小，看是否有菌絲、孢子、芽孢等，這也是區別細菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關鍵指標．

解答 解：（1）從土壤中分離出分解尿素的細菌，需用以尿素為唯一氮源的選擇性培養基．
（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的倒平板操作時，平板冷凝后，要將平板倒置，因為皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落入培養皿造成污染，還可使培養基表面的水分更好地揮發．
（3）接種過程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法．每次劃線前都要灼燒接種環的目的是殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落．操作的第一步和最后一步需灼燒接種環的目的分別是防止接種環上有其他微生物而污染培養基、以免菌種對環境造成污染．
故答案為：
（1）尿素　選擇　
（2）皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落入培養皿造成污染，還可使培養基表面的水分更好地揮發　
（3）稀釋涂布平板　第一步灼燒接種環是防止接種環上有其他微生物而污染培養基．每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落　劃線結束后仍要灼燒接種環以免菌種對環境造成污染

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記培養基的成分、種類及功能；掌握接種微生物常用的兩種方法，尤其是劃線分離操作中需要注意的有關問題，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．