Question

1．埃博拉病毒（EBOV）是一種能引起人類和靈長類動物發生埃博拉出血熱（EBHF）的烈性病毒，其遺傳物質為RNA，利用相應的生物學激素制備出抗EBOV的單克隆抗體，可快速檢測EBOV．請回答下列問題：
（1）途徑一：在制備抗EBOV的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的EBOV蛋白，一段時間后，從小鼠的脾臟中獲取B細胞，將獲得的細胞與小鼠的骨髓瘤細胞融合，再經過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，在細胞融合過程中體現了細胞膜具有的結構特點是一定的流動性．
（2）途徑二：可將無限增殖的基因用顯微注射技術導入能產生抗EBOV抗體的小鼠漿細胞中，以便源源不斷地產生抗EBOV的單克隆抗體，此細胞可來源于B細胞和記憶細胞的增殖分化．
（3）在途徑二中，將無限增殖的基因導入相應的免疫細胞的技術中，需要的工具酶為限制酶和DNA連接酶．
（4）埃博拉病毒（EBOV）侵入人體時，在細胞中以RNA為模板，在逆轉錄酶的作用下，合成相應的DNA并指導蛋白質合成，進行增殖．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）制備單克隆抗體時，首先給小鼠注射抗原，然后從小鼠的脾臟中獲取已經免疫的B細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，再經過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞；細胞融合過程體現了細胞膜具有一定的流動性．
（2）基因工程中，將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法；漿細胞來源于B細胞和記憶細胞的增殖分化．
（3）基因工程，將無限增殖的基因導入相應的免疫細胞的技術中，需要的工具酶為限制酶和DNA連接酶．
（4）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉錄過程．
故答案為：
（1）B    骨髓瘤          一定的流動性
（2）顯微注射       B細胞和記憶細胞     
（3）限制酶和DNA連接酶     
（4）逆轉錄

點評 本題考查基因工程、單克隆抗體的制備等知識，要求考生識記基因的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節；識記單克隆抗體的制備過程，能結合所學的知識準確答題．