Question

7．口蹄疫是由RNA病毒引起的一種偶蹄動物傳染病．科學家嘗試利用轉基因番茄生產口蹄疫疫苗（其主要成分是該病毒的一種結構蛋白VPl），過程如圖所示．請據圖回答下列問題：

（1）圖示②成功構建重組質粒的過程中，需要用到的工具酶是限制性核酸內切酶、DNA連接酶．
（2）圖示⑤⑥代表的過程分別是脫分化、再分化．
（3）若要檢測轉化成功的番茄植株，除檢測標記基因的產物外，還可采用分子雜交技術，檢測目的基因在番茄體內是否轉錄．
（4）圖示⑤⑥⑦代表的過程所涉及的生物工程技術是植物細胞工程（或植物組織培養）．
（5）在該過程中，研究人員首先獲取了目的基因，并采用PCR技術，對目的基因進行擴增．該技術需要的條件是：引物、酶、原料和模板；然后構建基因表達載體．基因表達載體中，除了具有目的基因、啟動子、終止子及復制原點之外，還需具有標記基因．
（6）圖中將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法．

Answer 1

分析 圖示表示利用轉基因番茄來生產口蹄疫疫苗，而口蹄疫病毒的遺傳物質為RNA，因此要獲得目的基因必須使用逆轉錄的方法獲得．
①表示目的基因的獲取、②表示目的基因與運載體重組、③表示目的基因導入農桿菌、④表示利用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞、⑤⑥⑦表示利用植物的組織培養技術培育轉基因植株．

解答 解：（1）圖示②成功構建重組質粒的過程中，首先需要利用同種限制酶切割目的基因和質粒，然后利用DNA連接酶將質粒和目的基因之間的黏性末端進行連接．
（2）圖中⑤⑥⑦表示利用植物的組織培養技術培育轉基因植株的過程，⑤表示脫分化形成愈傷組織，⑥表示再分化形成番茄幼苗．
（3）若要檢測轉化成功的番茄植株，除檢測標記基因的產物外，還可采用分子雜交技術，檢測目的基因在番茄體內是否轉錄．
（4）圖示⑤⑥⑦過程表示植物組織培養，該技術屬于植物細胞工程的范疇．
（5）在該過程中，研究人員首先獲取了目的基因，并采用PCR技術，對目的基因進行擴增．該技術需要的條件是：引物、酶、原料和模板；然后構建基因表達載體．基因表達載體中，除了具有目的基因、啟動子、終止子及復制原點之外，還需具有標記基因．
（6）圖中將目的基因導入受體細胞的方法是 農桿菌轉化法．
故答案為：
（1）限制性核酸內切酶   DNA連接酶　
（2）脫分化  再分化　
（3）分子雜交　
（4）植物細胞工程（或植物組織培養）　
（5）模板　標記基因　
（6）農桿菌轉化法

點評 本題難度適中，具有一定的綜合性，考查了基因工程、植物組織培養技術等知識，要求考生具有一定的識圖能力、識記能力、知識的遷移能力．考生要識記PCR技術的原理以及需要的條件，識記植物組織培養的過程以及愈傷組織的特點，識記基因工程的原理等．