Question

用限制酶BamHⅠ、HindⅢ單獨或聯(lián)合切割甲DNA分子（長度為14kb），在完全酶切（每個切點都被切斷）時得到的DNA片段長度如圖11所示（1kb即1000個堿基對）。圖12顯示了乙DNA分子上的BamHⅠ、HindⅢ的切點的情況。下列說法錯誤的是

A．甲DNA分子上沒有BamHⅠ的酶切位點，有一個HindⅢ的酶切位點

B．甲DNA分子為環(huán)狀DNA分子

C．用BamHⅠ和HindⅢ聯(lián)合切割甲DNA分子，最多可能得到7種不同長度線性片段

D．用BamHⅠ和HindⅢ聯(lián)合切割甲、乙DNA分子（所有切點都被切斷），然后用DNA連接酶處理酶切產(chǎn)物，最多能得到7種由兩個片段連接而成的環(huán)形重組DNA

Answer 1

A

解析試題分析：1該質(zhì)粒為環(huán)狀 DNA，經(jīng) SmaⅠ切割前，不含有游離的磷酸基團，經(jīng) SmaⅠ切割后形成平末端，含有 2 個游離的磷酸基團。 第 3 頁 共 186 頁 在2SmaⅠ識別的是 CCCGGG 序列， C 與 G 之間切割，SmaⅠ酶切位點越多，也就是 C—G堿基對越多，C 與 G 之間的氫鍵3 個比 A 與 T 之間的氫鍵2 個數(shù)量多，其含量越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高。3據(jù)圖 1 可知，SmaⅠ切割位點在抗生素抗性基因標記基因中，據(jù)圖 2 可知，SmaⅠ切割位點在目的基因中，因此使用 SmaⅠ切割會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源 DNA 中的目的基因。4用同一種限制酶處理質(zhì)粒和外源 DNA，再用 DNA 連接酶連接時，往往會有三種連接形式：目的基因—質(zhì)粒、目的基因—目的基因環(huán)化、質(zhì)粒—質(zhì)粒環(huán)化，后兩種是我們不需要的，因而要進行篩選。用兩種限制酶處理質(zhì)粒和外源 DNA，因形成的末端不同可避免上述情況的發(fā)生。5連接質(zhì)粒與目的基因的工具酶是 DNA 連接酶。6分析由 BamHⅠ和 HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源 DNA，并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒，這兩種酶的識別序列仍然完整存在，如再用 BamHⅠ和 HindⅢ兩種限制酶進行酶切時，可再度被切開，形成 2 種 DNA 片段；而 EcoR Ⅰ 的識別序列在原質(zhì)粒中存在并沒有破壞，同時切下的目的基因中還存在 1 個 EcoRⅠ的識別序列，因此在重組質(zhì)粒中存在 2 個 EcoRⅠ的識別序列，如用 EcoRⅠ和 HindⅢ酶切，可得到 3 種 DNA 片段。A錯誤；B錯誤；C錯誤；D正確。
考點：本題考查 的知識。意在考查能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學方式等多種表達形式準確地描述生物學方面的內(nèi)容的能力。