Question

2．為了獲得β-胡蘿卜素產品（β-胡蘿卜素較耐酸），某小組開展了產β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗．請回答下列問題：
（1）實驗用的培養皿常用的兩種滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應該用牛皮紙包扎器皿．
（2）為了篩選出酵母菌，培養基中添加了青霉素，此培養基從功能上分類屬于培養基，添加青霉素目的是抑制細菌（放線菌）生長．
（3）圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是．①（填序號）
①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表
③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表
（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結果其中一塊平板的各劃線區均未見菌生長，最可能的原因是接種環溫度過高，菌被殺死．
（5）為增加β-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細胞時，添加石英砂的目的是有助于研磨充分；研磨時不需要（填“需要”或“不需要”）添加CaCO₃，理由是β-胡蘿卜素較耐酸
（6）下列材料或用具：①培養細菌用的培養基與培養皿，②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，③實驗操作者的雙手．其中需要滅菌的是：①②（填序號）；需要消毒的是：③（填序號）．
（7）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．
2、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等

解答 解：（1）滅菌常用方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等，培養皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌．將培養皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報紙包扎避免滅菌后的再次污染．
（2）青霉素能破壞細菌的細胞壁并在細菌的繁殖期起殺菌作用，因此添加青霉素可抑制細菌的生長．
（3）乙連接軟管為排（放）氣閥，甲為安全閥，丙是壓力表．
（4）三塊平板有兩塊平板長有菌落，說明含有菌株并可在培養基上生長；而其中一塊未見菌落，說明菌株死亡．因此，應在接種過程中接種環灼燒后未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過高被殺死．
（5）石英砂有助于研磨充分．CaCO₃用于中和酸性物質，β-胡蘿卜素較耐酸，因此不需添加．
（6）在實驗中，①培養細菌用的培養基與培養皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌，③實驗操作者的雙手需要消毒．
（7）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉．
故答案為：
（1）干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）       用牛皮紙包扎器皿
（2）抑制細菌（放線菌）生長  
（3）①
（4）接種環溫度過高，菌被殺死
（5）有助于研磨充分      不需要       β-胡蘿卜素較耐酸
（6）①②；③
（7）滅菌

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記無菌技術；試劑接種微生物常用的兩種方法，能結合所學的知識準確答題．