Question

12．基因工程技術又稱為DNA重組技術，回答相關問題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即人工合成和從生物材料中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時構建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數目比基因組文庫中的少，其原因是cDNA文庫中只含有葉細胞已轉錄（或已表達）的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因．
（3）在基因表達載體中，啟動子是RNA聚合酶識別并結合的部位．若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞，最常用的原核生物是大腸桿菌（或答細菌）．
（4）將目的基因導入植物細胞時，采用最多的方法是農桿菌轉化法．

Answer 1

分析 1、基因文庫是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導入到受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因．
基因組文庫包含某種生物所有的基因；部分基因文庫包含某種生物的部分基因．如：cDNA文庫．
2、將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
3、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
4、基因表達載體的構建：
①過程：用同一種限制酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子．
②目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發揮作用．
③基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因
（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；
（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉錄的結束；
（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即人工合成和從生物材料中分離，人工合成可通過反轉錄法或人工化學合成法，從生物材料中分離即通過基因文庫法．
（2）由于cDNA文庫中只含有葉細胞已轉錄（或已表達）的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因，故兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數目比基因組文庫中的少．
（3）基因表達載體的組成包括目的基因+啟動子+終止子+標記基因，其中啟動子是RNA聚合酶識別并結合的部位；若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞，由于細菌繁殖速度快，故最常用的原核生物是大腸桿菌等細菌．
（4）將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法．
故答案為：
（1）人工合成   生物材料  
（2）cDNA文庫中只含有葉細胞已轉錄（或已表達）的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因
（3）RNA    大腸桿菌（或答細菌）
（4）農桿菌轉化

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應用，掌握各步驟中的相關細節，能運用所學的知識準確解答，屬于考綱識記和理解層次的考查．