Question

6．滅活的腫瘤細胞可作為疫苗用以提高機體對該類型腫瘤的免疫力．研究者利用熱休克蛋白（HSP70）基因轉入白血病細胞株（HL-60）制備疫苗并研究該疫苗的作用，過程及結果如下．

（1）構建HSP70基因表達載體時需使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶．在目的基因前需添加信號肽所對應的編碼序列，信號肽可引導剛翻譯出的HSP70進入內質網（細胞器），并最終使HSP70定位于HL-60細胞的表面．用抗HSP70的抗體（抗原-抗體雜交技術）檢測后發現，只有③組的HL-60細胞表面具有HSP70．設置②組作為對照，目的是排除空載體對實驗結果的影響．
（2）據A項檢測結果可知，膜表面具有HSP70的HL-60細胞能促進T淋巴細胞增殖．
（3）乳酸脫氫酶存在于每個細胞中，正常情況下很難透過細胞膜．在B項檢測中，48h后加入的HL-60細胞成為細胞裂解的對象，因而培養液中的乳酸脫氫酶含量可直接反映效應T效應T細胞裂解靶細胞的能力．
（4）綜上所述，HSP70能增強白血病腫瘤疫苗引起機體產生（特異性）免疫的能力，為白血病細胞治療和預防復發的帶來希望．

Answer 1

分析 分析圖1：①②兩組作為對照組，③作為實驗組，A項檢測T淋巴細胞的增殖能力，B項檢測培養液中乳酸脫氫酶的含量．
分析圖2：①②中A項檢測和B項檢測的結果相同，而③中A項檢測和B項檢測結果均明顯高于①②，A項檢測結果說明膜表面具有HSP70的HL-60細胞能促進T淋巴細胞增殖，B項檢測結果可直接反映效應T效應T細胞裂解靶細胞的能力．

解答 解：（1）構建基因表達載體時，首先需要限制酶切割外源DNA分子和運載體，其次需要DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子．在目的基因前需添加信號肽所對應的編碼序列，信號肽可引導剛翻譯出的HSP70進入內質網，并最終使HSP70定位于HL-60細胞的表面．檢測目的基因是否翻譯形成相應的蛋白質，可采用抗原-抗體雜交技術．設置②組作為對照，目的是排除空載體對實驗結果的影響．
（2）據A項檢測結果可知，轉入HSP70基因表達載體的HL-60，T淋巴細胞增殖能力明顯增強，這說明膜表面具有HSP70的HL-60細胞能促進T淋巴細胞增殖．
（3）乳酸脫氫酶存在于每個細胞中，正常情況下很難透過細胞膜，但若細胞被裂解，乳酸脫氫酶即可從細胞出來，導致培養液中乳酸脫氫酶的含量升高．因此在B項檢測中，48h后加入的HL-60細胞成為細胞裂解的對象，培養液中的乳酸脫氫酶含量可直接反映效應T效應T細胞裂解靶細胞的能力．
（4）綜上所述，HSP70能增強白血病腫瘤疫苗引起機體產生（特異性）免疫的能力，為白血病細胞治療和預防復發的帶來希望．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶    內質網     抗HSP70的抗體（抗原-抗體雜交技術）     排除空載體對實驗結果的影響
（2）促進T淋巴細胞增殖
（3）效應T效應T細胞裂解靶細胞
（4）細胞治療和預防復發

點評 本題結合圖解，考查基因工程及相關的探究實驗，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；掌握探究實驗的原則，能根據圖中信息準確答題，屬于考綱理解層次的考查．