Question

18．如圖為Ti質粒簡圖．已知目的基因在兩側分別有1個BamHⅠ和1個HindⅢ識別序列，而中間有1個EcoRⅠ的
識別序列．下列相關敘述錯誤的是（　　）

• A． 構建重組質粒應選擇BamHⅠ和HindⅢ，絕對不能選擇EcoRⅠ
• B． 在切割后的質粒與目的基因連接時會產生4個水分子
• C． 把切割后的質粒與目的基因混合時會產生4種不同連接方式的質粒
• D． 一般地，將重組質粒導入受體細胞的概率僅為10^-7左右

Answer 1

分析 基因工程的工具酶包括限制酶和DNA連接酶，為了便于質粒和目的基因重組，往往用同種限制酶切割質粒和目的基因．
分析題意可知，“目的基因在兩側分別有1個BamHⅠ和1個HindⅢ識別序列，而中間有1個EcoRⅠ的識別序列”，如果用EcoRⅠ限制酶切割則會導致目的基因破壞，因此不可取，則應選用BamHⅠ和HindⅢ限制酶分別切割．

解答 解：A、如果用EcoRⅠ限制酶切割則會導致目的基因破壞，因此不可取，A正確；
B、在切割后的質粒與目的基因連接時會形成4個磷酸二酯鍵，產生4個水分子，B正確；
C、選用BamHⅠ和HindⅢ限制酶分別切割質粒和目的基因，會使兩者之間定向連接，不會出現多種連接方式，C錯誤；
D、一般地，將重組質粒導入受體細胞的概率僅為10^-7左右，D正確．
故選：C．

點評 本題考查了基因工程的有關知識，要求考生能夠掌握兩種工具酶在基因工程中的應用，能根據題干所給信息確定使用的限制酶種類，同時明確使用兩種限制酶切割可以使目的基因和質粒進行定向連接．