Question

Ⅰ．根據微生物發酵技術的原理和要求回答下列問題：
（1）在整個微生物的分離和培養過程中，一定要注意在

 

條件下進行．
（2）在葡萄酒的自然發酵過程中，酵母菌的來源是

 

．
（3）若從含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分離到較純的酵母菌，最簡便的方案是在

 

條件下 選擇培養．
Ⅱ．根據有關酶和固定化細胞知識回答問題：
（4）制備固定化酵母細胞，常用的包埋材料是

 

，使用方法是

 

（填出號碼）．

（5）分離純化特定的酶，常使用的方法是凝膠色譜法和電泳法．凝膠色譜法是根據

 

分離蛋白質的有效方法，使用凝膠色譜法分離酶時，最先分離出來的是分子量

 

（大或小）的酶分子．使用電泳法分酶，影響酶電泳速度的因素有

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養,培養基對微生物的選擇作用,制備和應用固相化酶,酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

專題：

分析：1、制備固定化酵母的步驟為酵母細胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合→固定化酵母菌細胞，其中活化是讓處于休眠狀態的微生物重新恢復正常的生活狀態；
2、凝膠珠的顏色和形狀：如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試．

解答： 解：（1）微生物實驗室培養的關鍵就在于防止雜菌污染，故整個過程中要嚴格進行無菌操作．
（2）酵母菌無氧呼吸產生酒精，制作葡萄酒時，酵母菌來自于附著在葡萄皮上的野生型酵母菌．
（3）酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉這四種微生物中，只有酵母菌是兼性厭氧性生物（既能進行有氧呼吸也能進行無氧呼吸），故要分離到較純的酵母菌，可直接提供無氧環境進行分離．
（4）制備固定化酵母細胞，常用的包埋材料是海藻酸鈉，使用方法如圖③．
（5）凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質，相對分子質量大的由于不能進入凝膠通道而移動速度快，最先分離出來，使用電泳法分酶，影響酶電泳速度的因素有帶電多少、帶電性質、電壓的大小、分子的大小和形狀等．
故答案為：（1）無菌
（2）附著在葡萄皮上的野生型酵母菌        
（3）無氧
（4）海藻酸鈉   ③
（5）相對分子質量的大小   大  帶電多少、帶電性質、電壓的大小、分子的大小和形狀等

點評：本題主要考查選修一的相關實驗，知識點較單一，屬于考綱中識記水平，考生需將選修教材的內容熟記于心，才能自如作答．