Question

8．科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達．過程如圖，據圖回答：
（1）過程①表示采取反轉錄法的方法來獲取目的基因．
（2）形成圖中②含有目的基因的DNA（重組質粒）需要的酶包括：限制性核酸內切酶和DNA連接酶．
（3）基因工程中常用的載體除有質粒外，還有λ噬菌體的衍生物（動植物病毒）．重組質粒包括啟動子、目的基因、標記基因及終止子等部分．
（4）圖中③過程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，一般將受體大腸桿菌用氯化鈣處理，使細胞成為感受態細胞，從而使含有目的基因的重組質粒容易進入受體細胞．檢測大腸桿菌B是否導入了質粒或重組質粒，可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在含有（氨芐）青霉素的培養基上，若細菌能夠生長，說明：已導入了重組質粒或普通質粒A，理由：普通質粒和重組質粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，檢測目的基因是否插入受體細胞的染色體DNA上、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，用到的技術分別是DNA分子雜交技術、抗原-抗體雜交技術．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示利用基因工程培育抗蟲棉過程，其中①表示通過人工合成法獲取目的基因；②表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；③表示將目的基因導入受體細胞．

解答 解：（1）圖中①表示采用反轉錄法（人工合成法）獲取目的基因．
（2）②是基因表達載體，構建基因表達載體時，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（3）基因工程中常用的載體除有質粒外，還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒．重組質粒包括啟動子、目的基因、標記基因及終止子等部分．
（4）將目的基因導入大腸桿菌常用感受態細胞法，即用氯化鈣處理，使細胞成為感受態細胞，從而使含有目的基因的重組質粒容易進入受體細胞．質粒上有2個標記基因，但抗四環素基因被插入的目的基因破壞掉，因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因，如果在含氨芐青霉素的培養基上能生長，說明已經導入了重組質粒或普通質粒A，因為普通質粒和重組質粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，檢測目的基因是否插入受體細胞的染色體DNA上、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，用到的技術分別是DNA分子雜交技術、抗原-抗體雜交技術．
故答案為：
（1）反轉錄法    
（2）限制性核酸內切酶、DNA連接酶
（3）λ噬菌體的衍生物（動植物病毒）  目的基因  標記基因
（4）氯化鈣  感受態細胞  （氨芐）青霉素  普通質粒和重組質粒都含有抗氨芐青霉素的基因
（5）DNA分子雜交技術    抗原-抗體雜交技術

點評 本題結合轉基因棉花培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養等知識，要求考生識記基因工程的工程及操作步驟，能根據限制酶識別序列選擇合適的限制酶，并能準確判斷圖中各過程的名稱，再結合所學的知識準確答題．