Question

4．圖甲、乙分別表示質(zhì)粒和外源DNA，其中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，下列敘述正確的是（　　）

• A． 用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中，不能使用SmaI切割
• B． 圖甲所示的質(zhì)粒分子在經(jīng)SmaI酶切割后含有4個游離的磷酸基團(tuán)
• C． 為獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入DNA聚合酶
• D． 用EcoRI、HindⅢ和BamHI中的任意一種酶切割質(zhì)粒和外源基因都可以

Answer 1

分析 分析圖解：在質(zhì)粒上存在Sma I、EcoR I、HindⅢ和BamH I等四個酶切位點(diǎn)，但是Sma I的切割位點(diǎn)就在抗生素抗性基因上，該基因?yàn)檩d體的標(biāo)記基因，因此不可用．在目的基因上，Sma I、EcoR I、HindⅢ和BamH I四種酶也存在酶切位點(diǎn)，但是只有EcoR I具有兩個酶切位點(diǎn)，能切割完整的基因．

解答 解：A、質(zhì)粒中，Sma I的切割位點(diǎn)位于標(biāo)記基因（抗生素抗性基因）上，在外源DNA分子中，Sma I的切割位點(diǎn)位于目的基因上，因此用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma I切割，A正確；
B、圖甲所示的質(zhì)粒分子在經(jīng)SmaI酶切割后含有2個游離的磷酸基團(tuán)，B錯誤；
C、為獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶，C錯誤；
D、只使用EcoR I，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時，會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時，在目的基因上只有一個酶切位點(diǎn)，因此不能切割目的基因，D錯誤．
故選：A．

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．