Question

花椰菜易感染黑腐病菌而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如下圖．

據圖回答下列問題：
（1）過程①所需的酶是

 

，體現了酶的

 

性．
（2）過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的

 

存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（3）原生質體培養液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是

 

．原生質體經過

 

再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（4）微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導試管苗

 

，而與

 

配比適宜時可促進芽的增殖．若要抑制試管苗的生長，促進愈傷組織產生和生長，需要使用的生長調節劑是

 

．（脫落酸、2，4-D）
（5）要想檢測導入的黑腐病抗性基因基因是否表達，在分子水平上可用

 

法進行檢測，如果出現雜交帶，說明目的基因已經表達蛋白質產品．

Answer 1

考點：植物體細胞雜交的過程,植物培養的條件及過程

專題：

分析：（1）酶解法去掉細胞壁，獲得原生質體，與必修一酶的專一性相結合．
（2）等滲溶液維持細胞的滲透壓能保持細胞原有的形態．

解答： 解：（1）①過程為原生質體的制備，需要去掉細胞壁，細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，酶具有專一性等特點，故用纖維素酶和果膠酶；
（2）②為誘導融合，受體細胞是易感的幼根，供體是抗病的幼葉，誘導成功則在顯微鏡下能觀察到融合的活細胞中有供體的幼葉的葉綠體存在；
（3）去掉細胞壁后的原生質體，類似于動物細胞，易吸水漲破失水皺縮，適宜濃度的甘露醇可以維持一定的滲透壓，能保持原生質體完整性，雜種細胞形成的標志是再生出細胞壁，才能誘導脫分化再分化；
（4）生長素可以誘導生根，和細胞分裂素混合使用可以誘導生芽，要注意其中兩種激素的濃度、比例及使用的先后順序，2，4-D是植物生長調節的促進劑，脫落酸是植物生長調節的抑制劑；
（5）基因表達的產物是蛋白質，故檢測導入的黑腐病抗性基因基因是否表達，應用抗原-抗體雜交法檢測；
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶         專一
（2）葉綠體
（3）保持原生質體完整性       細胞壁
（4）生根    細胞分裂素      2，4-D
（5）抗原-抗體雜交

點評：本題考查學生的綜合運用能力，將植物體細胞雜交技術與基因工程相結合，并考查了必修三中植物激素的功能，既有復習回顧，又突出了本節重點，比較綜合．