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請分析回答下列關于基因工程的問題：（10分）

某種大腸桿菌的質粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（圖4），大腸桿菌的DNA分子中則含有β-半乳糖酶ω片段序列（圖3），由于天然大腸桿菌同時具備這兩種片段序列，可以使培養基中含有X-gal底物轉變成藍色產物，當缺少任意一個α或ω片段序列，X-gal底物不能轉變成藍色產物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分別為三種限制性內切酶，下圖5中箭頭所指為三種限制酶的切點。

（1）要能篩選出轉基因菌種，應選用的限制性內切酶是 ，選擇的依據是 。

（2）控制F8的基因也可以通過人體細胞相應的mRNA來合成，該合成的過程稱為 。如果F8基因表示人生長激素基因，則相應的mRNA可以從人體 （下丘腦細胞/垂體細胞/下丘腦和垂體細胞/所有體細胞）中獲取。

（3）重組質粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質粒的DNA分子導入大腸桿菌，通過含抗生素的培養基進行培養，觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進行判斷，如下圖。

在篩選時應該先用選擇培養基 （A/B）。

（4）將經轉基因技術處理過的質粒導入大腸桿菌后，再將大腸桿菌接種到含有X-gal底物的培養基培養一段時間后，培養基中出現較多的藍色菌落，這是因為 。

（5）控制F8的基因能在大腸桿菌細胞內得到表達，其遺傳學基礎是 。

（6）如果控制F8的基因長度為3000堿基對(bp)，用限制性核酸內切酶酶切后進行凝膠電泳，使降解產物分開。用酶A單獨酶切，結果如下圖l。用 酶B單獨酶切，結果如下圖2。用酶A和酶B同時酶切，結果如下圖3。請畫出該基因同時用酶A和酶B酶切時的作用位點示意圖（并標注好酶切后堿基片斷的長度）： 。

請分析回答有關微生物及其應用的問題：（10分）

Ⅰ、柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗。科學家發現，在微生物M產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如圖1）。

（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的微生物M，應選擇下列固體培養基（僅列出了碳氮源）中的 。（填編號）

A．蛋白胨、檸檬酸鐵銨 B．橄欖油、硫酸銨 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨

（2）微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測酶活性來確定其應用價值。為降低生物柴油生產成本，可利用________________技術使脂肪酶能夠重復使用，比較圖2中的三種工藝，最好選擇_________ 工藝。

Ⅱ、苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖3所示，①為土壤樣品。

（3）④為對照，微生物在④中不生長、在⑤中生長。④與⑤培養基的主要區別在于 ；使用 法可以在⑥上獲得單個菌落。

（4）采用固體培養基培養細菌時為什么要倒置培養？ 。

Ⅲ、急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌、病毒通過消化道進入人體導致的，因此檢驗飲用水的細菌含量和病毒含量是有效監控疾病發生的必要措施。

（5）檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是 ；

（6）分別取0.1mL已稀釋了103倍的水樣分別涂布到三個瓊脂固體培養基的表面進行培養，培養基記錄到大腸桿菌的菌落數分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數為 個。

（7）噬菌斑（如圖4）是在長滿細菌的培養基上，由一個噬菌體侵染細菌后，不斷裂解細菌產生的一個不長細菌的透明小圓區，它是檢出噬菌體數量的重要方法之一。現利用連續取樣、在培養基中培養的方法，測得噬菌體在感染大腸桿菌后數量變化曲線（圖5）。下列有關該曲線的敘述中錯誤的是( ) (多選，填編號)

A．曲線a～b段噬菌體數量不變，說明此階段噬菌體還沒有開始侵染細菌

B．曲線a～b段細菌細胞中正旺盛地進行細菌 DNA 的復制和有關蛋白質的合成

C．由b到c對應時間內噬菌體共繁殖了10代

D．限制c～d段噬菌斑數量增加的因素最可能是細菌已經絕大部分被裂解

請完成下列實驗探究：（10分）

Ⅰ 研究發現,兩種調節功能相近的激素如果同時使用, 其調節作用會進一步增強。某興趣小組為了探究甲狀腺激素和生長激素同時使用時對動物生長的促進作用程度，設計了如下的實驗：

（1）本探究實驗的假設為：(80) ____。

（2）根據實驗結果預測來完善以下實驗設計思路：

①取4只同種性別的成年的W品系的小鼠，分別編號為甲、乙、丙、丁四組。

②配制生理鹽水，并用生理鹽水配制A mol/L的甲狀腺激素溶液，B mol/L的生長激素溶液以及一定濃度的激素溶液X（每升X溶液含甲狀腺激素Amol和生長激素B mol）。且這些激素的濃度適宜。

③甲、乙、丙、丁組小鼠每只每天分別注射 （81） ，

④ （82） 。

（3）上述實驗思路①的設計是有問題的，請改正：

（83） 。

（4）從乙、丙、丁組的小鼠上所采集的數據如下圖所示:

（5）實驗結論（省略）

Ⅱ 科研人員為了探究生長素類似物吲哚丁酸(IBA)的不同使用方法和使用濃度對藍莓插條（插枝）生根的影響，開展了如下實驗研究。

① 方法與步驟：( 省略) 。

② 實驗結果：測定12天、18天和30天的生根率，獲得如下數據。

（6）本實驗中的對照組的組別為 。

（7）方法Ⅰ中若需進一步確定在培養基中添加IBA的最適濃度，則需要 。

（8）使用IBA誘導藍莓插條生根時，采用方法Ⅱ更好，原因是使用該處理方法時，在 等方面都具有明顯的優勢。

（9）請根據實驗數據繪出“當IBA濃度最適時，采用不同方法誘導藍莓生根的生根率隨時間變化”的柱形圖。

下列關于人體細胞中部分代謝場所的敘述，正確的是

A．產生二氧化碳的場所是線粒體

B．合成性激素的場所是高爾基體

C．合成核酸水解酶的場所是溶酶體

D．形成mRNA場所是細胞質基質

普通栽培稻是普通野生稻進化而來的，下列相關敘述正確的是

A．每株普通栽培稻都含有其種群基因庫的全部基因

B．人工選擇能夠改變普通栽培稻變異和進化的方向

C．普通野生稻在進化過程中遺傳多樣性會發生改變

D．普通野生稻受環境影響產生的變異都是不遺傳的

某生物興趣小組的同學將生長旺盛的洋蔥不定根置于4℃的冰箱冷藏室中培養36h后，剪取根尖制成臨時裝片，然后用顯微鏡觀察細胞中染色體的分裂相。下列敘述正確的是

A．低溫處理能阻斷洋蔥根尖細胞中DNA的復制

B．用改良苯酚品紅染液處理根尖可使染色體著色

C．制作臨時裝片前可用卡諾氏液維持細胞的活性

D．低倍鏡視野中所有細胞染色體數都已發生改變

阿糖胞苷是一種嘧啶類抗癌藥物，在細胞中能有效抑制DNA聚合酶的合成。當阿糖胞苷進入癌癥患者體內后，機體短期內可能發生的明顯變化是

A．神經遞質的合成減少，神經系統興奮性降低

B．淋巴細胞的生成減少，機體的免疫功能下降

C．糖蛋白的合成增加，癌細胞的轉移速度變慢

D．促進抑癌基因表達，癌細胞的細胞周期變長

細胞中絕大多數需要能量的生命活動都由ATP直接供能，下列敘述正確的是

A．ATP合成酶通過為ADP供能和降低活化能來催化ATP的合成

B．無光條件下，線粒體是植物葉肉細胞中能產生ATP的唯一場所

C．馬拉松運動中，骨骼肌細胞內ATP的水解速率遠大于合成速率

D．細胞中的能量通過ATP在吸能和放能反應之間的循環實現流通

Akita小鼠是一種糖尿病模型小鼠，該小鼠由于胰島素基因突變干擾了胰島素二硫鍵的形成，大量錯誤折疊的蛋白質累積在內質網中，導致相關細胞的內質網功能持續紊亂，并最終啟動該細胞的凋亡程序。下列敘述不正確的是

A．胰島素空間結構的形成離不開內質網的加工

B．內質網功能紊亂會誘發某些特定基因的表達

C．Akita小鼠胰島A細胞和胰島B細胞大量凋亡

D．Akita小鼠體內肝臟細胞合成糖原的速率減慢

下圖表示某植物葉片暗反應中C3和C5化合物微摩爾濃度的變化趨勢，該植物在Ⅰ階段處于適宜環境條件下，Ⅱ階段改變的環境條件是降低光照強度或者降低CO2濃度中的某一項。下列分析正確的是

A．圖中物質甲轉變成乙需要消耗光反應提供的ATP

B．圖中Ⅱ階段所改變的環境條件是降低了光照強度

C．Ⅱ階段甲上升是因為葉綠體中[ H ]和ATP的積累

D．Ⅱ階段光合速率最大時所需光照強度比Ⅰ階段低