Question

請分析回答下列關于基因工程的問題：（10分）

某種大腸桿菌的質粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（圖4），大腸桿菌的DNA分子中則含有β-半乳糖酶ω片段序列（圖3），由于天然大腸桿菌同時具備這兩種片段序列，可以使培養基中含有X-gal底物轉變成藍色產物，當缺少任意一個α或ω片段序列，X-gal底物不能轉變成藍色產物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分別為三種限制性內切酶，下圖5中箭頭所指為三種限制酶的切點。

（1）要能篩選出轉基因菌種，應選用的限制性內切酶是 ，選擇的依據是 。

（2）控制F8的基因也可以通過人體細胞相應的mRNA來合成，該合成的過程稱為 。如果F8基因表示人生長激素基因，則相應的mRNA可以從人體 （下丘腦細胞/垂體細胞/下丘腦和垂體細胞/所有體細胞）中獲取。

（3）重組質粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質粒的DNA分子導入大腸桿菌，通過含抗生素的培養基進行培養，觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進行判斷，如下圖。

在篩選時應該先用選擇培養基 （A/B）。

（4）將經轉基因技術處理過的質粒導入大腸桿菌后，再將大腸桿菌接種到含有X-gal底物的培養基培養一段時間后，培養基中出現較多的藍色菌落，這是因為 。

（5）控制F8的基因能在大腸桿菌細胞內得到表達，其遺傳學基礎是 。

（6）如果控制F8的基因長度為3000堿基對(bp)，用限制性核酸內切酶酶切后進行凝膠電泳，使降解產物分開。用酶A單獨酶切，結果如下圖l。用 酶B單獨酶切，結果如下圖2。用酶A和酶B同時酶切，結果如下圖3。請畫出該基因同時用酶A和酶B酶切時的作用位點示意圖（并標注好酶切后堿基片斷的長度）： 。

Answer 1