Question

8．如圖所示為動物細胞培養的基本過程示意圖．

請回答：
（1）容器A 中放里的一般是幼齡動物的器官或組織，原因是其細胞分裂能力強，易于培養．培養時先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散細胞，制成B 瓶中的細胞懸液．將細胞懸液轉入C 瓶中進行的初次培養稱為原代培養．
（2）細胞正常培養了一段時間后，發現細胞絕大部分死亡，只有極少數細胞存活，這是因為存活的細胞發生了突變，可無限增殖．目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型．
（3）C、D 瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的抗生素．培養過程中還需要提供O₂和CO₂ 等氣體環境，CO₂的作用主要是維持培養液的PH值．
（4）動物細胞體外培養時，通常要在培養基中補充一定濃度的某些物質．下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養影響的實驗結果．據圖可知，培養培養正常細胞一定需要添加血清．

Answer 1

分析 本題主要考查動物細胞培養的過程．
1、動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養．
2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制．
3、動物培養條件：
（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養液，以清除代謝廢物
（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH：
（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養液的PH．）

解答 解：（1）容器A 中放里的一般是幼齡動物的器官或組織，原因是其細胞分裂能力強，易于培養．培養時先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散細胞，制成B 瓶中的細胞懸液．將細胞懸液轉入C 瓶中進行的初次培養稱為原代培養．
（2）細胞正常培養了一段時間后，發現細胞絕大部分死亡，只有極少數細胞存活，這是因為存活的細胞發生了突變，可無限增殖．目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型．
（3）C、D 瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的抗生素．培養過程中還需要提供O₂和CO₂ 等氣體環境，CO₂的作用主要是維持培養液的PH值．
（4）分析曲線圖：是否添加血清對于癌細胞的增殖影響不大，而對于正常細胞增殖影響很大，故培養正常細胞一定需要添加血清．
故答案為：
（1）分裂能力強    胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）  原代培養
（2）突變   10   二倍體
（3）抗生素  維持培養液PH
（4）正常

點評 本題主要考查學生對知識的理解和分析能力．細胞株傳至50代后，不能再傳下去，但有部分存活的細胞一般能夠傳到40～50代，這種傳代細胞叫做細胞株．細胞株細胞的遺傳物質沒有發生改變．當細胞株傳至50代以后又會出現“危機”，不能再傳下去．但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變，而且帶有癌變的特點，有可能在培養條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞成為細胞系．