Question

科研人員將綠色熒光蛋白（GTP）基因導入金魚的受精卵中進行有關研究，請回答：
（1）上述過程中的GTP基因稱為

 

，該基因可由mRNA

 

形成．
（2）已知GTP基因的DNA兩端分別有EcoR I、Sma I切割位點，切割下來的GTP基因含有

 

 末端和

 

末端．
（3）質粒用EcoR I、Sma I切割之后，需用

 

將GTP基因與其連接形成重組質粒．
（4）GTP基因重組質粒導入受精卵通常用

 

法，受精卵經過卵裂、桑椹胚、

 

、原腸胚等階段發(fā)育為胚胎．紫外光下觀察，可以看到轉基因魚發(fā)光部位存在差異，其原因是

 

．
（5）構建重組質粒時，可用GTP代替抗氨芐青霉素基因作為

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析：1、目的基因：主要指編碼蛋白質的結構基因，也可以是一些具有調控作用的因子．獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取  ②利用PCR技術擴增  ③人工合成（化學合成）．
2、限制性核酸內切酶主要是從原核生物中分離純化出來的．其能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．結果是經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．在構建基因表達載體時，DNA連接酶將目的基因和質粒重組．
2、將目的基因導入動物細胞的方法：顯微注射技術．（最有效一種方法）．具體操作程序：目的基因表達載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性動物的子宮或輸卵管內發(fā)育→新性狀動物．

解答： 解：（1）將綠色熒光蛋白（GTP）基因導入金魚的受精卵中進行有關研究，說明GTP基因是目的基因．獲取目的基因的方法有很多，可以通過mNRA反轉錄法人工合成．
（2）據題可知EcoRI、SmaI上限制性酶，它們分別可將目的基因切割，并產生黏性末端和平口末端．
（3）在構建基因表達載體時，需要DNA連接酶將目的基因和質粒中被限制酶切割的末端連接．
（4）受體細胞是動物細胞時，可用顯微注射法將基因表達載體轉化入受體細胞中．早期胚胎發(fā)育經過卵裂期、桑葚胚期、囊胚期、原腸胚期．紫外光下觀察，可以看到轉基因魚可以發(fā)光，說明了目的基因在受體中已經能表達出相應的蛋白質了，但是發(fā)光部位存在差異，說明了目的基因的表達具有選擇性．
故答案為：
（1）目的基因    反轉錄 
（2）黏性   平
（3）DNA連接酶
（4）顯微注射   囊胚   基因選擇性表達
（5）標記基因

點評：本題考查了基因工程的相關內容，意在考查能理解所學知識的要點，能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論．